SD大鼠腦缺血再灌注及阿托伐他汀干預(yù)后HSP22和P-Akt表達(dá)變化研究.pdf

1、目的:觀察SD大鼠腦缺血再灌注后HSP22和P-Akt的表達(dá)變化及阿托伐他汀干預(yù)后對(duì)兩個(gè)蛋白表達(dá)的影響，探討HSP22和P-Akt在腦缺血再灌注中可能的作用機(jī)制以及阿托伐他汀在缺血再灌注中的可能保護(hù)機(jī)制。
　　方法:采用線栓法制作SD大鼠腦缺血再灌注模型，缺血2h，再灌注72h。52只雄性大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組、假手術(shù)組、缺血再灌注組及阿托伐他汀干預(yù)組（阿托伐他汀+缺血再灌注）。正常組和假手術(shù)組不做任何處理，缺血再灌注組僅生理鹽水

2、灌胃，阿托伐他汀干預(yù)組在再灌注后大鼠蘇醒時(shí)、24h、48h分別予生理鹽水配制的10mg/kg阿托伐他汀灌胃。72h時(shí)處死所有大鼠，分別留取標(biāo)本行TTC染色、HE染色及TUNEL染色，Western blot方法檢測HSP22、Akt、P-Akt及Caspase3表達(dá)變化;采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1、再灌注72h后，腦組織TTC染色發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀干預(yù)組腦梗死體積(％)較缺血再灌注組明顯減小(16

3、.72±3.63％ vs.23.83±2.53％)。
　　2、TUNEL染色發(fā)現(xiàn)正常組及假手術(shù)組見極少TUNEL陽性細(xì)胞（1.00±0.76 vs.1.1±0.83）;缺血再灌注組TUNEL陽性細(xì)胞散在于整個(gè)缺血半暗帶，分布欠均勻，部分區(qū)域相對(duì)集中，高倍鏡下胞核呈棕褐色的為陽性細(xì)胞，與正常組及假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001);阿托伐他汀處理后，干預(yù)組TUNEL陽性細(xì)胞較缺血再灌注組明顯減少（25.13±3.18 v

4、s.43.88±4.12），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　3、Western blot方法檢測發(fā)現(xiàn)，正常組和假手術(shù)組大鼠腦皮質(zhì)HSP22和P-Akt表達(dá)基本一樣（0.43±0.07 vs.0.45±0.10;0.66±0.04 vs.0.68±0.05），Caspase-3只有微弱表達(dá)（0.17±0.02 vs.0.19±0.04），兩組間比較無明顯差異(P＞0.05);缺血再灌注72h后，腦皮質(zhì)HSP22、P-Akt

5、及Caspase3表達(dá)均顯著增加(1.76±0.13 vs.1.67±0.10 vs.0.64±0.04)，與正常組及假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。但是，阿托伐他汀干預(yù)后腦皮質(zhì)HSP22和Caspase3表達(dá)減少(1.06±0.19 vs.0.34±0.08)，而P-Akt表達(dá)進(jìn)一步增加(2.14±0.27)，與缺血再灌注組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　結(jié)論:
　　1、SD大鼠腦缺血再

6、灌注損傷后，作為對(duì)缺血應(yīng)激的反應(yīng)，HSP22/P-Akt/Caspase-3信號(hào)通路軸可能是內(nèi)源性自身保護(hù)機(jī)制之一。
　　2、阿托伐他汀可能作用于熱休克應(yīng)激反應(yīng)的起始環(huán)節(jié)，從而減輕腦缺血應(yīng)激反應(yīng)，使HSP22表達(dá)下調(diào);
　　3、阿托伐他汀能促進(jìn)腦缺血應(yīng)激后P-Akt表達(dá)增加，PI3K/Akt信號(hào)通路可能是阿托伐他汀保護(hù)腦缺血再灌注損傷機(jī)制之一;
　　4、阿托伐他汀可以降低腦缺血再灌注后Caspase-3表達(dá)，具有抑制神