丙氨瑞林PLGA微球藻緩釋給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，EM)指具有生長功能的子宮內(nèi)膜，在子宮被覆面以外的地方生長繁殖而成的一種婦科疾病，可以導(dǎo)致痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、不孕等婦科癥狀，現(xiàn)今首選的治療方式是給予促性腺激素釋放激素激動劑(GnRH)。目前國內(nèi)市場上使用的治療藥物丙氨瑞林粉針對該病癥有很好的療效，給藥方式是150μg/次，一天一次，一個療程持續(xù)3～6月，然而，每天的頻繁給藥顯著增加了患者的痛苦，降低了患者順應(yīng)性。本課題旨在通過研制丙氨瑞林的長效

2、緩釋制劑，降低給藥頻次，有效提高患者的順應(yīng)性。
　　 首先，本文建立了原料藥丙氨瑞林和微球中丙氨瑞林藥物的含量測定方法，并進行了相關(guān)的方法學(xué)驗證。考察原料藥丙氨瑞林溶液在不同溫度和不同pH溶液中的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)在4℃，pH=5.6的緩沖液中最穩(wěn)定。
　　 其次，本文采用W1/O/W2復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備丙氨瑞林微球，針對影響微球的包封率和粒徑等因素進行制備工藝的優(yōu)化。制備工藝的影響因素包括內(nèi)水相粘度、PLGA濃度、初乳化功率

3、、初乳化制備溫度、外水相PVA濃度、外水相體積、復(fù)乳攪拌速度、外水相滲透壓和藥物濃度等單因素影響因素的考察，發(fā)現(xiàn)對粒徑和包封率影響較大的因素是初乳功率、PLGA濃度、初乳的制備溫度、PVA濃度。針對上述幾個影響因素進行了正交實驗設(shè)計考察，從而篩選出工藝重現(xiàn)性好，藥物包封率高，突釋量小且持續(xù)釋放完全的處方制備工藝。所確定的優(yōu)選工藝條件是初乳功率200 W、PLGA濃度為33％(w/v)、初乳溫度為4℃、PVA濃度為3％。以該優(yōu)選后的工藝條

4、件制備的微球的包封率為97.3±1.5％，突釋量為6.5±3.5％，粒徑約為75μm，微球能夠持續(xù)釋藥35 d，微球中有機溶劑殘留量符合要求。
　　 第三，丙氨瑞林注射微球作為注射用藥須無菌，因此本課題采用60Co輻射照射對微球進行滅菌，研究了不同的輻照劑量對微球的影響。通過考察AR-MPs照射前后的形態(tài)特征、丙氨瑞林的含量變化和體外釋放趨勢的變化，采用電子掃描電鏡(SEM)、凝膠滲透色譜(GPC)、差示掃描量熱分析(DSC)等

5、方法對微球的各項指標進行考察比較。實驗結(jié)果顯示，60Co輻射滅菌后微球的表觀形態(tài)上沒有明顯變化，25 kGy劑量輻射滅菌后微球的丙氨瑞林含量較未照射前降低了5％，經(jīng)不同劑量60Co照射滅菌和未經(jīng)照射滅菌微球的體外釋放趨勢沒有改變，60Co輻射滅菌后的微球的突釋量減少。PLGA原料、空白微球和AR-MPs經(jīng)過25 kGy60Co輻射滅菌照射后的Tg值有顯著性差異(P＜0.05)，隨著60Co輻射滅菌劑量的增加，PLGA載體的分子多分散系數(shù)

6、降低。另外，通過對經(jīng)過60Co輻射滅菌照射和未經(jīng)60Co輻射滅菌的微球的穩(wěn)定性考察，發(fā)現(xiàn)AR-MPs在4℃/35％ RH的條件下最為穩(wěn)定。可以得出結(jié)論，60Co輻射滅菌方法可以適用于丙氨瑞林微球滅菌，達到無菌要求。
　　 最后，本文考察了丙氨瑞林微球在比格犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)，分別比較了丙氨瑞林粉末注射劑、未經(jīng)60Co輻射滅菌的丙氨瑞林微球和經(jīng)過25 kGy劑量60Co輻射滅菌的丙氨瑞林微球在比格犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)，測定了

7、半衰期(t1/2)，最大血藥濃度（Cmax），達峰時間（tmax），平均駐留時間（MRT）和生物利用度等參數(shù)。結(jié)果表明，經(jīng)25 kGy60Co輻射滅菌的AR-MPs和未經(jīng)60Co輻射滅菌的AR-MPs的半衰期是丙氨瑞林粉針劑的65.87倍和68.74倍，經(jīng)25 kGy60Co輻射滅菌的AR-MPs和未經(jīng)60Co輻射滅菌的AR-MPs的體內(nèi)滯留時間是丙氨瑞林粉針劑的71.94倍和75.84倍，經(jīng)25 kGy60Co輻射滅菌的AR-MPs和

8、未經(jīng)60Co輻射滅菌的AR-MPs的相對生物利用度為260.47±52.71％和263.82±58.68％，說明注射用丙氨瑞林緩釋微球的生物利用度大大提高，研制的注射用丙氨瑞林緩釋微球試驗制劑與注射用丙氨瑞林對照制劑相比，在狗體內(nèi)的藥代動力學(xué)行為明顯表現(xiàn)為達峰時間延遲，峰濃度降低，藥時曲線末端相消除半衰期(t1/2)和平均駐留時間（MRT）均有較大延長，達到了所設(shè)計的緩釋釋藥特征，丙氨瑞林在比格犬體內(nèi)的血藥濃度與體外的釋放趨勢一致。

9、r>　　 綜上所述，本文采用W1/O/W2復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備的丙氨瑞林PLGA微球，在經(jīng)過工藝制備優(yōu)化后，提高了微球的包封率，減少了微球的突釋量，獲得了制備工藝簡單，重現(xiàn)性好的丙氨瑞林微球制備方法，制得可緩釋四周的丙氨瑞林微球?？疾炝?0Co輻射對丙氨瑞林微球制劑的影響，為后期的臨床使用提供一定的研究基礎(chǔ)。通過微球制劑在比格犬的體內(nèi)藥動學(xué)考察，證明了本課題研究制備的丙氨瑞林微球制劑具有緩釋特征，為丙氨瑞林的劑型改造提供了理論依據(jù)和方法