1,25-(OH)2VitD3對(duì)高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞UCP2表達(dá)及氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、目的:觀察1,25-(OH)2VitD3對(duì)高糖誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)中活性氧(ROS)、線粒體膜電位(ΔΨm)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)表達(dá)的影響,探討其在糖尿病腎病(DN)氧化應(yīng)激中的作用。
　　方法:體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞分為正常對(duì)照組(NG)、高糖處理組(HG)、高滲對(duì)照組(MG)、高糖培養(yǎng)液中加入不同濃度的VitD3(V1組10-9mol/L、V2組10-8mol/L、V3組

2、10-7mol/L),并設(shè)置N-乙酰半胱氨酸藥效對(duì)照組(NAC)及無(wú)水乙醇溶劑對(duì)照組(SG)。觀測(cè)胞內(nèi)ROS熒光強(qiáng)度、線粒體膜電位的變化,并進(jìn)一步檢測(cè)細(xì)胞UCP2mRNA、蛋白表達(dá)情況以及各組細(xì)胞中T-SOD活力和丙二醛(MDA)水平。
　　結(jié)果:(1)HG組ROS熒光強(qiáng)度較NG組明顯升高,而V1組與NAC組熒光強(qiáng)度均較HG組減弱;(2)HG組細(xì)胞的ΔΨm顯著低于NG組(P<0.01),應(yīng)用1,25-(OH)2VitD3和NAC后

3、,兩組ΔΨm與HG組比較顯著下降(均P<0.01);(3)HG組T-SOD活力顯著低于NG組(P<0.01),而MDA水平顯著高于NG組(P<0.01);加入不同濃度的1,25-(OH)2VitD3三組(V1、V2、V3)較HG組T-SOD活力均顯著增高(均P<0.05),而MDA水平均顯著低于HG組(均P<0.01),且均呈劑量依賴性;(4)在NG組正常培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞即存在UCP2mRNA和蛋白的表達(dá)。HG組培養(yǎng)24h后UCP2m

4、RNA表達(dá)即升高,培養(yǎng)72h后HG組UCP2mRNA表達(dá)與NG組比較顯著增加(P<0.05);在HG組細(xì)胞中同時(shí)加入不同濃度的1,25-(OH)2VitD3處理72h后,UCP2的基因和蛋白的高表達(dá)與HG組比較顯著降低(均P<0.01),且呈劑量依賴關(guān)系。
　　結(jié)論:(1)高糖可誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷;(2)1,25-(OH)2VitD3可能通過(guò)降低ΔΨm、ROS生成及調(diào)節(jié)胞內(nèi)UCP2表達(dá)抑制高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)