鋅、鐵和錳離子與乳鐵蛋白聯(lián)合對乙肝病毒體外作用的研究.pdf

1、本研究采用天然HBV感染HepG2細(xì)胞建立病毒細(xì)胞模型，通過四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)測定天然乳鐵蛋白、缺鐵乳鐵蛋白以及鋅、鐵、錳飽和乳鐵蛋白對細(xì)胞的毒性并確定最大無毒作用劑量，并以此劑量作梯度稀釋進(jìn)行抗病毒研究；試驗采用ELISA法應(yīng)用乙型肝炎表面抗原試劑盒檢測乙型肝炎表面抗原的被抑制情況，同時采用熒光定量PCR法對HBV-DNA的被抑制情況進(jìn)行測定。結(jié)果如下：(1)應(yīng)用MTT法測定缺鐵乳鐵蛋白、鋅飽和乳鐵蛋白、鐵飽和乳鐵蛋白、錳

2、飽和乳鐵蛋白的細(xì)胞毒性，鋅、鐵和錳對細(xì)胞的最大無毒劑量(TD0)分別為1.5·L-1、3.0·L-1和1.5·L-1，缺鐵乳鐵蛋白對細(xì)胞的半數(shù)中毒劑量(TD50)為8.312g·L-1，最大無毒劑量(TD0)為1.5g-L-1。試驗均采用其無細(xì)胞毒性劑量進(jìn)行抗病毒研究。(2)當(dāng)HBV感染細(xì)胞以后，缺鐵乳鐵蛋白對HBsAg分泌無抑制作用(最高抑制率為14.78％)，對HBV-DNA沒有顯著抑制作用(P＞0.05)，缺鐵乳鐵蛋白不能抑制乙型

3、肝炎病毒。(3)當(dāng)HBV感染細(xì)胞以后，鋅飽和乳鐵蛋白、鐵飽和乳鐵蛋白、錳飽和乳鐵蛋白對HBV-DNA有顯著抑制作用(P＜0.05)，并呈現(xiàn)出劑量效應(yīng)關(guān)系，抑制效果為：鋅飽和乳鐵蛋白＞錳飽和乳鐵蛋白＞鐵飽和乳鐵蛋白，乳鐵蛋白的鐵飽和度以及結(jié)合的離子類型影響其抑制HBV-DNA效果。(4)單純的鋅、鐵、錳離子不能抑制HBV-DNA，乳鐵蛋白的抗HBV-DNA作用是蛋白與金屬的整體作用。本研究結(jié)果表明，在體外鋅、鐵、錳飽和乳鐵蛋白對HBV-D