LAM和ECV聯(lián)合治療慢性乙肝患者對(duì)乙肝病毒耐藥基因多位點(diǎn)變異研究.pdf

1、目的:本研究通過(guò)比較拉米夫定（lamivudine，LAM）和恩替卡韋(entecavir, ECV)聯(lián)合用藥，及各自單獨(dú)用藥前后乙肝患者血清HBV-DNA水平、YMDD耐藥基因突變位點(diǎn)及基因分型的變化，為臨床合理制定抗乙肝病毒治療方案提供依據(jù)和參考。
　　方法:
　　1、選擇明確診斷的HBeAg陽(yáng)性乙肝患者150例，治療前未檢測(cè)出HBV-YMDD變異。隨機(jī)分為聯(lián)合用藥組、單獨(dú)用藥組1、單獨(dú)用藥組2，各組50例。聯(lián)合用藥組患

2、者每日口服拉米夫定50mg和恩替卡韋0.5mg，單獨(dú)用藥組1患者每日單用拉米夫定100mg，單獨(dú)用藥組2患者每日單用恩替卡韋1.0mg。
　　2、在各組患者治療前及治療后第6、12、18、24個(gè)月時(shí)分別采集血液樣本，檢測(cè)外周血T細(xì)胞亞群變化、HBeAg陰轉(zhuǎn)率、HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率、HBV-YMDD變異率、基因分型、分析RT區(qū)(rt180M、rt184L/S、rt204V、rt204I、rtS202G、rtM250L)位點(diǎn)變異。

3、r>　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:使用SPSS16.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，兩樣本率的比較采用x2檢驗(yàn)。三個(gè)樣本均數(shù)的比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析，三個(gè)樣本率的比較采用行×列x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、3組患者在治療前均無(wú)YMDD變異，治療后YMDD變異率呈逐漸增加趨勢(shì)，但YMDD變異率存在較大的差距。聯(lián)合用藥組患者治療后各期YMDD變異率均低于單獨(dú)用藥組1和單獨(dú)用藥組

4、2，聯(lián)合用藥組各期均與單獨(dú)用藥組1差異有顯著性(P＜0.01)，但聯(lián)合用藥組各期均與單獨(dú)用藥組2差異無(wú)顯著性(P＞0.05)，單獨(dú)用藥組2各期均低于單獨(dú)用藥組1，各期差異均有顯著性(P＜0.01)。
　　2、3組患者在治療后HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率呈逐漸增加趨勢(shì)，治療后第6、12個(gè)月時(shí)，3組間無(wú)顯著性差異;治療后18、24個(gè)月，單用藥組1患者的治療后HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率明顯低于聯(lián)合用藥組和單用藥組2，差異有顯著性(P＜0.05或P＜0

5、.01);但聯(lián)合用藥組各期均與單獨(dú)用藥組2差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。
　　3、3組患者在治療后HBeAg陰轉(zhuǎn)率呈逐漸增加趨勢(shì)，但聯(lián)合用藥組HBeAg陰轉(zhuǎn)率各期均明顯高于單獨(dú)用藥組兩組，差異有顯著性(P＜0.05或P＜0.01)。
　　4、3組患者在治療前外周血CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+/CD8+比值的差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后第6、12、18、24個(gè)月3組患者外周血CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)呈逐漸增

6、加趨勢(shì)，CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)呈逐漸減少趨勢(shì)，CD4+/CD8+比值呈逐漸增加趨勢(shì)，經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析，3組間各期指標(biāo)的改善差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)，聯(lián)合用藥組外周血CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)高于單用藥組2，單用藥組2高于單用藥組1;聯(lián)合用藥組CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)低于單用藥組2，單用藥組2低于單用藥組1;聯(lián)合用藥組CD4+/CD8+比值高于單用藥組2，單用藥組2高于單用藥組1。各組內(nèi)在治療后各期指標(biāo)的改善差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001

7、)。
　　5、治療后24個(gè)月時(shí)，單用藥1組患者中檢出乙肝病毒耐藥基因突變類型分別為rtL180M+M204V、rtL180M+M204I、rtM204I;單用藥2組患者中檢出耐藥基因突變類型分別為rtT184L、rtT184S、rtT184L+M204V、rtS202G、rtM250L;聯(lián)合用藥組中檢出耐藥突變類型分別為rtT184L+L180M+M204V、rtT184L+S202G+L180M+M204V、 rtM250L+M

8、204I。
　　治療后24個(gè)月時(shí)，3組之間突變率差異有顯著性（x2=24.72，P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1、3組慢性乙肝患者在治療前及治療后第6、12、18、24個(gè)月各指標(biāo)的檢測(cè)分析顯示LAM和ECV聯(lián)合用藥較兩種藥物單用藥可以更有效改善患者外周血T細(xì)胞亞群，提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能（CD4+/CD8+比值），顯著抑制HBV-DNA病毒的復(fù)制，提高HBeAg陰轉(zhuǎn)率，降低HBV-YMDD變異率。
　　2、初期

9、使用拉米夫定聯(lián)合恩替卡韋較初期單用恩替卡韋或拉米夫定治療慢性乙型肝炎耐藥突變例數(shù)少。
　　3、單用拉米夫定患者中耐藥類型中rtM204I較多見(jiàn)，其次為rtL180M+M204V和rtL180M+M204I;單用恩替卡韋患者中耐藥類型中rtT184L/S和rtT184L+M204V較多見(jiàn)，其次為rtS202G和rtM250L;聯(lián)合用藥患者中耐藥類型為rtT184L+L180M+ M204V、rtM250L+M204I和rtT184L