細胞分化相關基因胚胎肝細胞分化因子-15(ELDF-15)真核細胞表達載體的構(gòu)建及功能的初步研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學碩士學位論文細胞分化相關基因胚胎肝細胞分化因子—15（ELDF15）真核細胞表達載體的構(gòu)建及功能的初步研究姓名：劉艷申請學位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學指導教師：張世馥2003.1.1中國協(xié)和醫(yī)科大學碩士學位論文2NCBIGenBankdatabase檢索結(jié)果表明：ELDF保留了完整的3’端信號傳導序列和部分編碼序列。我們將其在GenBank進行注冊，注冊號為AF394227。同源性分析比較結(jié)果表明：與8種基因有高度的同源

2、性。其中ELDFl5的eDNA與人源性AT2受體相關蛋白1(ATIPl)基因同源性高達100％。迄今，有關ATIPl的功能國際、國內(nèi)尚未報道。本實驗擬對ELDFl5功能進行初步探討。以ELDFl5eDNA為探針，利用NorthernBlot和間接免疫熒光實驗對該片段進行組織和細胞種屬特異性表達及定位的研究。結(jié)果顯示：在人胎兒骨髓，睪丸、肌肉、腎臟、肝、脾、胃、心、腦、肺10種組織中表達較強，其中它在腎、骨髓、肝、脾、心臟、肺組織中表達明

3、顯高于睪丸、肌肉、胃、腦組織。在I臨床病理腫瘤組織如：以在組織中恒定表達的GAPDH為對照，ELDFl5在幾種癌組織中如：子宮癌、膽囊癌、胃癌、肝癌均表達增強，但在相應癌旁組織中，ELDFl5的表達明顯低于癌組織。同樣，我們利用幾種人腫瘤細胞系如：人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞(HD)、人肺腺癌細胞(HAC)、人肝癌細胞(Bel)、人肺低轉(zhuǎn)移癌細胞(L—c)、小細胞肺癌(295)，人紅白血病細胞(K。)進行雜交，結(jié)果顯示均高表達。另外，我們分析

4、了ELDFl5在正常小鼠腎、血、肝、脾、骨髓、腦、心組織中的表達，結(jié)果顯示ELDFl5在所有小鼠組織中低表達。間接免疫熒光實驗結(jié)果顯示，ELDFl5片段定位在細胞膜。根據(jù)以上結(jié)果：ELDFl5在低分化程度的胚胎組織，腫瘤組織及腫瘤細胞系中高表達；而在分化成熟的正常組織中和癌旁組織中，則表達較低的現(xiàn)象，提示ELDFl5基因可能與細胞分化、增殖和個體發(fā)育以及腫瘤發(fā)生密切相關。由此。我們設想，可否利用反義技術，將重組的反義ELDFl5基因片段