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1、Smurf2(Smad ubiquitination regulatory factor2)是泛素-蛋白酶體系統(tǒng)中E3泛素連接酶HECT家族中的一員,與TGF-β/Smad信號(hào)通路密切相關(guān)。Smurf2主要通過(guò)降解TGF-β/Smad信號(hào)通路中的受體(TGF-βR),轉(zhuǎn)錄因子Smads,從而對(duì)TGF-β/Smad信號(hào)通路進(jìn)行負(fù)調(diào)控。然而,Smurf2敲除小鼠在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中并沒(méi)有明顯的異常,同時(shí)敲除Smurf2和Smurf1卻導(dǎo)致胚胎致
2、死,猜測(cè)可能是由于其同家族成員Smurf1在功能上對(duì)Smurf2具有代償作用。
為了排除Smurf1對(duì)Smurf2功能上的補(bǔ)償效應(yīng),精確研究其在不同生長(zhǎng)發(fā)育階段對(duì)TGF-β信號(hào)通路的調(diào)節(jié)機(jī)制,我們進(jìn)行了Smurf2條件性敲除小鼠模型的構(gòu)建。在條件性敲除質(zhì)粒的構(gòu)建方面,運(yùn)用PCR技術(shù)將兩端的同源臂和目標(biāo)敲除外顯子分段從小鼠基因組中擴(kuò)增出來(lái),通過(guò)構(gòu)建中間質(zhì)粒將所有的片段連接起來(lái),并接入外源的loxP、Frt-Neo-Frt-l
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