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1、泛素—蛋白酶復(fù)合體系統(tǒng)是一類廣泛存在于真核生物體體內(nèi)的重要蛋白質(zhì)降解系統(tǒng),參與DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞內(nèi)吞、抗原呈遞等幾乎所有生物學(xué)過程。蛋白質(zhì)的泛素化是一個高度有序且具有選擇性的過程,由E1、E2、E3、泛素及底物蛋白參與,E3決定了泛素化修飾過程的特異性。
Smurf1(Smad ubiquitination regulatory factor1)是HECT E3泛素連接酶Nedd4家族中的主要成員,主
2、要通過與Smad1、Smad5發(fā)生作用,對TGF-β/BMP信號通路進(jìn)行調(diào)控。除了Smads,其他方面的研究還發(fā)現(xiàn)TGF-β受體、小G蛋白RhoA、骨特異性轉(zhuǎn)錄因子Runx2以及磷酸化形式的MEKK2等也可被Smurf1泛素化降解。越來越多的研究表明Smurf1在癌癥發(fā)生、病灶轉(zhuǎn)移、骨形成等方面均起著重要的調(diào)節(jié)作用,因此以Smurf1作為靶點蛋白來進(jìn)行藥物篩選受到了越來越廣泛的重視。但是,Smurf1的體內(nèi)活性調(diào)控機(jī)制依然尚未闡明。
3、r> 為了探索Smurf1的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制,我們對Smurf1上游序列進(jìn)行了克隆,構(gòu)建了Smurf1基因報告系統(tǒng),從中我們確定了上游序列里對下游基因表達(dá)影響較大的幾個區(qū)域;隨后我們檢測了TNF-α、TGF-β/BMP激活、敲低RhoA等條件對Smurf1轉(zhuǎn)錄的影響,發(fā)現(xiàn)他們之間并沒有明顯的聯(lián)系。
之前的研究表明MS9可能與Smurf1發(fā)生相互作用,為了進(jìn)一步考察MS9的生理學(xué)功能,我們進(jìn)行了MS9條件性敲除小鼠的構(gòu)建。
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