體外共同培養(yǎng)的鼠骨骼肌成肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞間連接的形態(tài)和電生理學(xué)研究.pdf

1、本研究將新生SD大鼠的骨骼肌成肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞在體外共同培養(yǎng)，從形態(tài)學(xué)和電生理學(xué)兩個層面研究二者間連接的性質(zhì)，并對可能的影響因素進(jìn)行初步分析。整個實驗共分五個部分?！　〉谝徊糠纸⒑线m的骨骼肌成肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞體外共同培養(yǎng)的模型。在含20％胎牛血清DMEM液中，骨骼肌成肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞可共同培養(yǎng)；心肌細(xì)胞主要對骨骼肌成肌細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，而對骨骼肌成肌細(xì)胞的融合、成熟無促進(jìn)作用。第二部分探尋共同培養(yǎng)的骨骼肌成肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞間連接的

2、形態(tài)學(xué)證據(jù)。體外共同培養(yǎng)的心肌細(xì)胞與骨骼肌成肌細(xì)胞間確有形成類似于縫隙連接的物質(zhì)基礎(chǔ)并可形成連接。第三部分明確共同培養(yǎng)的骨骼肌成肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞中連接相關(guān)蛋白Connexin43、Cadherin、NCAM的表達(dá)情況。骨骼肌成肌細(xì)胞在與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)后，有一些特性“心肌細(xì)胞化”，融合、成熟延遲，Connexin43表達(dá)增多，可以與心肌細(xì)胞形成縫隙連接。第四部分對影響骨骼肌成肌細(xì)胞Connexin43蛋白表達(dá)增多的因素進(jìn)行初步分析。骨骼肌

3、成肌細(xì)胞在“心肌環(huán)境”及“共同培養(yǎng)環(huán)境”的培養(yǎng)液中培養(yǎng)主要表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)量的增長及分化、成熟的延遲，而Connexin43表達(dá)并不增加，表明與心肌細(xì)胞的互相接觸是影響骨骼肌成肌細(xì)胞分化的重要因素；單純增加電、機(jī)械刺激的頻率不能使Connexin43表達(dá)增多；心肌細(xì)胞對共同培養(yǎng)的骨骼肌成肌細(xì)胞分化的影響因素是多因素復(fù)合作用。第五部分分析共同培養(yǎng)的心肌細(xì)胞與骨骼肌成肌細(xì)胞間的電信號傳導(dǎo)特點(diǎn)以判斷連接的性質(zhì)。證實骨骼肌成肌細(xì)胞能與心肌細(xì)胞形成共