何首烏對肝臟損害的物質基礎及其機制研究.pdf

1、目的：本課題通過何首烏不同成分及制首烏對肝細胞凋亡及P450含量的影響，以及何首烏不同炮制品對肝臟CYP2E1基因mRNA表達及CYP2E1酶活性的影響，旨在探究何首烏致肝損害的物質基礎及其作用機制。也為進一步探索何首烏炮制方法與導致肝損害之間的關系提供科學依據(jù)。
　　 方法：用制首烏不同成分提取物大黃素、大黃酸、大黃酚，以及制首烏分別按不同劑量給予大鼠灌胃，每天一次，觀察大鼠一般情況，連續(xù)給藥3個月后，摘眼球采血檢測ALT和A

2、ST指標，頸總動脈處死檢測肝細胞凋亡指數(shù)及細胞色素P450含量。篩選出何首烏致肝損害的化學成分，制何首烏和此種物質按一定劑量給予小鼠灌胃，連續(xù)給藥4周，摘眼球采血檢測ALT和AST指標，頸總動脈處死檢測肝細胞凋亡率。用何首烏的不同炮制品即清蒸首烏、黑豆汁制首烏A、B、C分別給予大鼠灌胃，觀察大鼠一般情況，連續(xù)給藥3個月后，摘眼球采血檢測ALT和AST指標，頸總動脈處死檢測肝臟CYP2E1基因mRNA表達水平、CYP2E1酶活性及肝臟的病

3、理學變化。
　　 結果：給藥期間，與對照組比較，各給藥組食、水攝入量沒有差異。在何首烏不同成分致肝損害的實驗研究中，各給藥組大鼠血清中ALT 均有不同程度的升高，與空白組比較，大黃酚組大鼠血清ALT 升高具有顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.05），大黃素組大鼠血清AST 升高具有顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.05）；制首烏及大黃酚組肝細胞凋亡指數(shù)明顯增加有非常顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.01），而大黃素、大黃酸組肝細胞凋亡指數(shù)無明顯變化（P

4、>0.05）；各給藥組肝臟細胞色素P450 含量無明顯變化（P>0.05）。在制首烏及大黃酚致小鼠肝細胞凋亡實驗中，發(fā)現(xiàn)各給藥組小鼠血清ALT、AST 均有不同程度的升高，但與空白組比較無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；制首烏組、大黃酚組肝細胞凋亡率均升高，與空白組比較，肝細胞凋亡率均有顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.05）。在何首烏不同炮制品致肝損害的實驗研究中，清蒸組大鼠血清中AST 升高具有非常顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.01），黑豆汁制首烏

5、A、B、C組大鼠血清AST 升高具有顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.05），各給藥組大鼠血清ALT 無明顯變化（P>0.05）；與空白組比較，各給藥組CYP2E1基因mRNA表達水平明顯降低(P<0.01)，各給藥組間無明顯差異(P>0.05)；與空白組比較，黑豆汁制首烏B組、黑豆汁制首烏C組對大鼠肝微粒體CYP2E1 酶活性有顯著性誘導作用（P<0.05）；清蒸組、黑豆汁制首烏A組對大鼠肝微粒體CYP2E1 酶活性均無顯著性影響(P>0.0

6、5)；病理觀察顯示：與空白組比較，各給藥組出現(xiàn)了明顯的病理改變。
　　 結論：何首烏中導致肝細胞凋亡的主要成分很有可能是大黃酚等某種成分，并且會對肝臟造成一定程度的損害。何首烏不同炮制品均能夠顯著抑制CYP2E1 mRNA的表達；黑豆汁制首烏B、C組能夠誘導大鼠肝微粒體CYP2E1 酶活性，清蒸及黑豆汁制首烏A組對其影響不顯著；各給藥組肝臟的病理結果主要表現(xiàn)為肝細胞脂肪變性，色素顆粒沉積，炎細胞浸潤，由此得知何首烏不同炮制方法與