慢性髓細(xì)胞白血病異基因外周血聯(lián)合骨髓造血干細(xì)胞移植后NK細(xì)胞表型及功能重建的研究.pdf

1、目的 觀察慢性髓細(xì)胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)患者進(jìn)行異基因外周血聯(lián)合骨髓造血干細(xì)胞移植(allo-PBSCT+BMT)后免疫重建中NK細(xì)胞表型及其受體譜重建的規(guī)律和NK細(xì)胞功能的重建情況。 方法 選擇11例采用 HLA6/6 位點(diǎn)相合同胞 allo-PBSCT+BMT的 CML 患者，其中慢性期6例，加速期1例，急變期4例；男性9例，女性2例；中位年齡35歲(18～45歲

2、)。使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)移植受者植入時(shí)、移植后30天、60天、90天、120天、180天、270天、360天的T細(xì)胞、NK細(xì)胞表型及其受體譜的變化和重建規(guī)律。同時(shí)取10名健康志愿者進(jìn)行T細(xì)胞、NK細(xì)胞及其受體譜的檢測(cè)作為對(duì)照。植入時(shí)和移植后30天采集移植受者外周血分離單個(gè)核細(xì)胞使用<'51>Cr以K562細(xì)胞為靶細(xì)胞進(jìn)行體外殺傷實(shí)驗(yàn)，正常志愿者外周血分離的單個(gè)核細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照。 結(jié)果 1，造血重建時(shí)NK細(xì)胞即開(kāi)始重建，

3、移植后30天(+30天)NK細(xì)胞絕對(duì)值達(dá)到高峰，約占淋巴細(xì)胞的(37.1±7.06)％，較正常水平明顯升高，+60天后比例恢復(fù)正常。2，NK細(xì)胞受體：活化性受體NKP46在+30天時(shí)比例高達(dá)(92.1+33.65)％，一年內(nèi)逐漸下降。另一活化性受體NKG2D植入時(shí)為(36.7±14.33)％，+60天迅速上升至正常水平，以后一直穩(wěn)定在正常水平；抑制性受體NKG2A在植入時(shí)占NK細(xì)胞的(90.3±15.35)％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常水平，但+60

4、天迅速下降到(45.8±12.36)％，以后比例較穩(wěn)定；抑制性受體CD158a在移植后一年內(nèi)始終低于正常水平，CDl58b植入時(shí)在正常水平，+60天CD158b逐漸上升達(dá)到NK細(xì)胞的(58.5±6.58)％，高于正常水平并基本穩(wěn)定。CD94在移植后一年始終占NK細(xì)胞90％以上，與正常水平類似；各種NK受體譜在移植后120天基本達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。3，NK細(xì)胞殺傷功能在植入時(shí)達(dá)到正常水平，+30天時(shí)殺傷功能高于正常對(duì)照(P<0.05)。

5、 結(jié)論 Allo-PBSCT+BMT與其他移植方式相比，移植后NK細(xì)胞比例雖略低，但以成熟表型為主，并且NK細(xì)胞的殺傷功能在植入時(shí)即達(dá)到正常人水平，移植后30天殺傷功能增強(qiáng)，殺傷率明顯大于正常對(duì)照。同時(shí)11例移植受者中位隨訪18(13～27)月，急性GVHD發(fā)生率9％，復(fù)發(fā)率為零、預(yù)計(jì)二年無(wú)事件生存率90.9％。我們認(rèn)為allo-PBSCT+=BMT 療效優(yōu)于 allo-PBSCT 或allo-BMT，除免疫重建迅速外推測(cè)NK