去膽管及去門靜脈肝葉肝細胞功能分化的實驗研究.pdf

1、目的：建立大鼠去膽管肝葉和去門靜脈肝葉自身對照模型，觀察去膽管肝葉及去門靜脈肝葉肝細胞形態(tài)變化及功能分化的現(xiàn)象和規(guī)律，探討去膽管肝葉的保留價值。 方法：切除大鼠肝左葉和尾狀葉，只保留方葉和右葉兩個肝葉。然后應用氰基丙烯酸酯對其肝右葉膽管進行栓塞并結扎來制備去膽管肝葉；對肝方葉行門靜脈結扎制備去門靜脈肝葉。分別設立未處理空白對照S組、單純栓塞并結扎右葉膽管BL組、單純結扎方葉門靜脈PL組和栓塞結扎肝右葉膽管，同時結扎方葉門靜脈的B

2、PL組，共四個組，觀察時間2周至2月；通過對各組動物膽管和門靜脈分別灌注硫酸鋇明膠混懸液制備鑄型標本，并運用Micro-CT掃描來觀察兩葉肝臟膽道和門靜脈形態(tài)變化，了解兩葉之間是否存在交通支情況，來判別該模型的可行性。通過測定分肝靜脈血肝功能等化驗檢查、組織病理學觀察、透射電鏡超微結構觀察以及肝組織蛋白質(zhì)組學研究來探討相應肝葉肝細胞形態(tài)及功能變化。 結果：(1)大鼠手術后在本觀察期內(nèi)存活率達到100％，無黃疸表現(xiàn)。肝葉大體形態(tài)觀

3、察和兩葉肝重量比指標顯示，去膽管肝葉未見明顯的萎縮和纖維化，去門脈肝葉萎縮及纖維化明顯。(2)Micro-CT鑄型掃描可以直觀地展現(xiàn)膽管和門靜脈形態(tài)變化，未發(fā)現(xiàn)兩個肝葉之間存在交通支或側枝循環(huán)情況。(3)分肝靜脈血測定發(fā)現(xiàn)去膽管肝葉和去門脈肝葉血ALT、AKP存在不同程度的升高，白蛋白和纖維蛋白原有降低趨勢，血直間接膽紅素和總膽汁酸水平無明顯升高。各肝葉與S組相比多項指標存在顯著性差異，自身對照顯示去門脈肝葉各指標改變更明顯，去膽管肝葉

4、相對改變較小。(4)組織病理學檢查：去膽管肝葉肝小葉結構無明顯變化。去門脈肝葉肝小葉結構破壞隨術后時間的延長愈加明顯，但增生的膽小管數(shù)目增多。(5)透射電鏡超微結構觀察：去膽管肝葉肝細胞富含線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和游離核糖體；毛細膽管腔縮小，其內(nèi)微絨毛破壞明顯。去門脈肝葉肝細胞胞漿中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少，滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多，其毛細膽管結構顯示正常。(6)蚤白質(zhì)組學觀察：去膽管肝葉白蛋白、載脂蛋白A1、磷酸丙糖異構酶表達無明顯降低，Z蛋白和Y蛋白降低明