豬胰腎聯(lián)合移植胰腺急性排斥反應(yīng)早期診斷的實驗研究.pdf

1、第一部分豬門靜脈回流、腸內(nèi)引流胰腎聯(lián)合移植模型的建立 【目的】建立豬的門靜脈回流、腸內(nèi)引流胰腎聯(lián)合移植模型。 【方法】四川當(dāng)?shù)仉s交第一代長白豬，共36例，根據(jù)血型相容的原理進行兩兩配對，分成供體和受體兩組，各18例，進行移植手術(shù)。 1供體手術(shù)：根據(jù)豬的解剖特點，同時參照腦死亡腹部多器官的聯(lián)合整塊切方法，設(shè)計了迅速建立原位低溫灌注，然后進行胰、腎聯(lián)合整塊切取的方法，熱缺血時間為零。 2受體手術(shù)：常規(guī)行頸外靜

2、脈置管，以便術(shù)中監(jiān)測、術(shù)后輸液和取血檢查；全胰和右腎切除后，移植物胰腺靜脈與受體門靜脈行端側(cè)吻合；腎靜脈間端端吻合；將帶有腹腔干，腸系膜上動脈和右腎動脈的腹主動脈段與受體腎下腹主動脈吻合；十二指腸與空腸上段行端側(cè)吻合；移植腎的尿液和胰液體外引流。 3術(shù)后處理：輸液，動態(tài)監(jiān)測移植物功能狀況，定時進行病理檢查并觀察其并發(fā)癥。 【結(jié)果】行胰腎聯(lián)合移植18例，1例因麻醉意外死亡，手術(shù)成功率為94.4％；術(shù)后第一次活檢死亡1例，第

3、二次活檢術(shù)后死亡2例，術(shù)后第六天因嚴重急性排斥反應(yīng)死亡1例。切取胰腺30分鐘后，血糖、胰島素及胰高血糖素均下降有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；移植手術(shù)完畢可見胰液和尿液引出，術(shù)后血糖穩(wěn)定在正常范圍內(nèi)。病理檢查發(fā)現(xiàn)，術(shù)后3天有排斥反應(yīng)出現(xiàn)，第7天全部發(fā)生排斥反應(yīng)，但血糖和胰腺內(nèi)分泌功能在術(shù)后各階段變化與術(shù)前無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 【結(jié)論】在研究胰腎聯(lián)合移植時，1型糖尿病模型的建立采用胰腺切除是可行的，該模型符合生理，存活率高

4、、重復(fù)性好；建立門靜脈回流，腸內(nèi)引流的胰腎聯(lián)合移植大動物模型，為臨床上進一步的開展和完善該術(shù)式以及對其基礎(chǔ)理論與臨床研究奠定了基礎(chǔ)。 第二部分胰腎聯(lián)合移植時胰腺、腎及十二指腸急性排斥反應(yīng)的相關(guān)性研究 【目的】研究在胰腎聯(lián)合移植中腎臟和十二指腸的病理變化在診斷胰腺排斥反應(yīng)的價值。 【方法】四川當(dāng)?shù)仉s交第一代長白豬，共36例，根據(jù)血型相容的原理進行兩兩配對，分成供體和受體兩組，各18例，進行移植手術(shù)。術(shù)前1天及術(shù)后3

5、、5、7天行胰腺內(nèi)分泌功能檢測，術(shù)后3、5、7天開腹行胰腺、腎臟和十二指腸活檢。對胰腺排斥反應(yīng)時內(nèi)分泌功能變化和上述三種器官排斥反應(yīng)的相關(guān)性進行研究。 【結(jié)果】1胰腺早期急性排斥反應(yīng)時，血糖、胰腺內(nèi)分泌功能變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；2術(shù)后3天，胰腺、腎臟和十二指腸排斥的例數(shù)分別為5、7和6例，5天為12、13和13例，術(shù)后7天，三種器官均發(fā)生排斥反應(yīng)；3術(shù)后3天，腎臟和十二指腸與胰腺在急性排斥反應(yīng)時有較好的相關(guān)性，其相關(guān)

6、系數(shù)分別為64.8％和71.8％，術(shù)后5天分別為70.3％和83.2％；4三種器官之間排斥反應(yīng)程度不一致，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 【結(jié)論】在SPK胰腺發(fā)生急性排斥反應(yīng)時，腎臟、十二指腸與胰腺間的病理改變有很好的相關(guān)性，十二指腸與胰腺的相關(guān)性較腎臟更好；單獨通過腎臟或十二指腸的病理改變，不能確診胰腺的早期急性排斥反應(yīng)，聯(lián)合分析腎臟和十二指腸的病理改變，可診斷胰腺的急性排斥反應(yīng)；急性排斥反應(yīng)早期，胰腺的內(nèi)分泌改變明顯滯后於

7、病理改變。 第三部分細胞因子在早期診斷胰腺急性排斥反應(yīng)的研究 【目的】在胰腎聯(lián)合時，探討不同組織及相同組織不同時間點的IL-2和IL-4在mRNA和蛋白水平上的表達對早期診斷胰腺急性排斥反應(yīng)的意義。 【方法】實驗動物為四川當(dāng)?shù)仉s交第一代長白豬，共44例，分兩組，對照組8例，實驗組根據(jù)血型相容的原理進行兩兩配對，分成供體和受體，各18例。實驗組行同種異體胰腎聯(lián)合移植，對照組僅行開腹游離胰腺和右腎，胰液和移植腎尿液體

8、外引流，其腹腔暴露時間和實驗組手術(shù)時間大致一致。分別在術(shù)前1天和手術(shù)完畢、術(shù)后1、3、5、7天取血，行內(nèi)分泌功能檢測，用RT-PCR和ELISA檢測IL-2和IL-4的mRNA和蛋白表達；術(shù)后3、5、7天開腹取胰腺、腎臟和十二指腸組織，行常規(guī)病理和組織中IL-2和IL-4的mRNA和蛋白表達的檢測。 【結(jié)果】1實驗組與對照組血清中血糖、胰島素和胰高血糖素水平變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；2實驗和對照組術(shù)后血清中IL-2較術(shù)前

9、均明顯升高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但兩組血清中的IL-2的變化在術(shù)前、手術(shù)完畢、術(shù)后1、3天之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；術(shù)后第5～7天較術(shù)前升高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；IL-4在各組間均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；3IL-4在術(shù)后各階段與正常胰腺組織相比，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；4術(shù)后3天胰腺組織中IL-2的mRNA和蛋白表達較術(shù)前升高，二者間有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 【結(jié)論】在急性排斥反應(yīng)早