可注射性細(xì)胞型納米組織工程骨的構(gòu)建及其應(yīng)用于牽拉成骨的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、一、骨髓基質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨細(xì)胞與腎血管內(nèi)皮細(xì)胞直接共培養(yǎng)的體外實(shí)驗(yàn)研究　　目的:本實(shí)驗(yàn)研究旨在培養(yǎng)骨髓基質(zhì)干胞(BMSCs)誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞和腎血管內(nèi)皮細(xì)胞作為組織工程的種子細(xì)胞，鑒定其生物學(xué)特性，并將二者直接共培養(yǎng)，以觀察兩種細(xì)胞直接接觸是否具有良好的細(xì)胞相容性，并探索二者共培養(yǎng)的合適比例?！　》椒?抽取兔骨髓，通過(guò)離心法獲取骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，經(jīng)條件培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得成骨細(xì)胞；采用三步梯度篩網(wǎng)腎血管球外植法獲得腎微血管內(nèi)皮細(xì)胞；兩種細(xì)胞按

2、不同比例直接共培養(yǎng)，觀察細(xì)胞形態(tài)，計(jì)數(shù)細(xì)胞比較增殖能力，檢測(cè)堿性磷酸酶(ALP)活性，研究共培養(yǎng)后成骨細(xì)胞成骨能力的改變。　　結(jié)果BMSCs可在條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)下分化為成骨細(xì)胞，經(jīng)鑒定堿性磷酸酶和礦化結(jié)節(jié)染色陽(yáng)性；從細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖情況看，共培養(yǎng)細(xì)胞增殖快于單一細(xì)胞培養(yǎng)，成骨細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞按2：1比例培養(yǎng)的優(yōu)于按3：1和1：1比例培養(yǎng)，，增殖最快；從成骨細(xì)胞ALP染色陽(yáng)性率看，和血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)的成骨細(xì)胞染色陽(yáng)性率比單純成骨細(xì)胞高，其中

3、成骨細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞按2：1比例培養(yǎng)優(yōu)于按3：1和1：1比例培養(yǎng)，陽(yáng)性率最高，表明血管內(nèi)皮細(xì)胞能夠顯著增強(qiáng)成骨細(xì)胞的ALP活性。　　結(jié)論骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在體外可定向誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞；BMSCs誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞和腎血管內(nèi)皮細(xì)胞體外直接共培養(yǎng)具有良好的相容性，可促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化，并促進(jìn)ALP的分泌，同時(shí)提高成骨細(xì)胞的成骨能力；二者按2：1混合是較佳比例。 二、可注射性細(xì)胞型納米組織工程骨的構(gòu)建及其生物相容性的體外實(shí)驗(yàn)研究　　目的