基因標(biāo)志提高原發(fā)性腸道惡性淋巴瘤內(nèi)鏡活檢診斷率的研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文基因標(biāo)志提高原發(fā)性腸道惡性淋巴瘤內(nèi)鏡活檢診斷率的研究姓名：陳利申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：消化內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：郭文20060512中文摘要一般來講，B 細(xì)胞性淋巴瘤陽性表達(dá)C D 2 0 ，免疫球蛋白重鏈?zhǔn)瞧浜苡杏玫臉?biāo)記物，絕大多數(shù)B 細(xì)胞性淋巴瘤都有I gH 基因重排；T 細(xì)胞性淋巴瘤陽性表達(dá)C D 4 5 R 0 、C D 3 ，T 細(xì)胞受體是其有用的標(biāo)記物，幾乎所有的T 細(xì)胞性淋巴瘤都有T C R 基因重排，而

2、且近年的研究發(fā)現(xiàn)，抗凋亡蛋白b c l 一2 、s u r v i v i n 在腫瘤組織中廣泛增強(qiáng)，因此可以檢測(cè)腸道淋巴瘤中的抗凋亡蛋白、免疫表型及基因克隆性重排等基因標(biāo)志來提高腸道淋巴瘤的內(nèi)鏡活檢率。本課題研究的目的在于篩選高效、方便、經(jīng)濟(jì)的對(duì)腸道淋巴瘤更進(jìn)一步診斷與鑒別診斷的檢測(cè)指標(biāo)，以提高內(nèi)鏡活檢診斷率，并擬定該病內(nèi)鏡活檢的程序化診斷檢測(cè)模式。方法：1 ．通過對(duì)照手術(shù)病理回顧性總結(jié)腸道淋巴瘤內(nèi)鏡形態(tài)特征和超聲內(nèi)鏡聲像圖，H E

3、染色常規(guī)病理學(xué)觀察和免疫組織化學(xué)染色及其活檢陽性率。2 ．通過免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)2 4 例腸道淋巴瘤和2 0 例克羅恩病活檢標(biāo)本中C D 3 、C D 2 0 、C D 4 5 R O 、B c l ．2 、S u r v i v i n 的表達(dá)，隨意計(jì)數(shù)1 0 0 0 個(gè)淋巴細(xì)胞中的陽性細(xì)胞，計(jì)算其他陽性表達(dá)率。采用S P S S l l ．5 軟件利用O n eW a y A N O V A行L S D 分析組間差異，以P <

4、; 0 ．0 5 為差異顯著性意義。3 ．提取2 4 例腸道淋巴瘤和2 0 例克羅恩病活檢標(biāo)本( 石蠟標(biāo)本) 的基因組D N A ，根據(jù)I g H 基因序列和T C R Y 受體基因序列設(shè)計(jì)引物，然后用P C R 技術(shù)分別擴(kuò)增I g H 的V —D —J 區(qū)( 9 0 —1 2 b p ) 和T C R Y 的V —J 區(qū)( 2 3 0 —2 4 5 b p ) ，采用銀染S S C P 技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，并用B 、T 淋巴瘤細(xì)胞株作為陽性

5、對(duì)照，如出現(xiàn)與陽性標(biāo)本相一致的主條帶認(rèn)為有克隆性重排。4 ．利用S P S S l l ．5 軟件對(duì)前面實(shí)驗(yàn)獲得的7 個(gè)指標(biāo)( C D 3 、C D 2 0 、C 0 4 5 R 0 、B c l 一2 、S u r v i v i n 、I g H 、T C R ) 進(jìn)行逐步判別分析。結(jié)果：1 ．腸道淋巴瘤在內(nèi)鏡下大體形態(tài)表現(xiàn)為潰瘍型1 8 例( 7 5 ％) ，其次為息肉4例型( 1 6 ．7 ％) 和彌漫型2 例( 8 ．3 ％)