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文檔簡介
1、目的:從pET28a/rSjGST重組質(zhì)粒中誘導(dǎo)表達rSjGST，過柱純化。制備針對rSjGST抗原的雜交瘤細胞株，獲得其單克隆抗體(McAb)，觀察重組抗原26ku SjGST及其McAb用于血吸蟲病診斷價值。 方法:用His-Bind Purification Kit純化rSjGST，以此抗原免疫BalB/C小鼠，6周后用免疫鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行雜交融合，HAT篩選出雜交瘤細胞，經(jīng)有限稀釋法克隆化，擴大
2、培養(yǎng)制備針對rSjGST抗原的單抗細胞株。親和層析法純化單抗。ELISA法檢測急性血吸蟲病患者和非流行區(qū)正常人血清。 結(jié)果：成功獲得重組26ku SjGST；并篩選出能夠長期分泌抗rSjGST單克隆抗體的雜交瘤細胞株；ELISA與Westen-blotting均檢測出雜交瘤細胞培養(yǎng)上清中的rSjGST-Ab。ELISA檢測32份患者血清結(jié)果表明，26ku rSjGST用于急性血吸蟲患者血清中抗體檢測的陽性率為90.6％；抗rSj
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