氧化苦參堿對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型中TLR9通路的影響及其對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的改善作用.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究氧化苦參堿（Oxymatrine， OMT）對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative Colitis，UC）大鼠模型中TLR9/Myd88/NF-κB通路中各因子表達(dá)水平和結(jié)腸組織中SOD、MDA表達(dá)水平的影響，探討OMT對(duì)TLR9通路的抑制作用及其在抗脂質(zhì)過(guò)氧化損傷中的作用，以期闡明其抗炎抗氧化機(jī)制，為UC的治療提供更多的藥物選擇。
　　材料和方法：選取SPF級(jí)SD大鼠，雄性，體重（250±20）g，共75只，隨

2、機(jī)分為模型組、OMT組、美沙拉嗪組、OMT+美沙拉嗪組、空白對(duì)照組5組，每組15只。大鼠禁食不禁水24小時(shí)后予以麻醉，硅膠管插入肛門(mén)8厘米處，注入三硝基苯磺酸（TNBS，100mg/kg）+乙醇，造模后正常供應(yīng)飲食，第2天起空白對(duì)照組及模型組給予蒸餾水灌胃，其余各組給予相應(yīng)藥物灌胃，1周后每組各取3只大鼠結(jié)腸組織進(jìn)行大體形態(tài)學(xué)及組織學(xué)觀察，2周后剩余全部大鼠殺取結(jié)腸組織，應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)各組TLR9、Myd88、NF-κB mR

3、NA的表達(dá)水平，應(yīng)用黃嘌呤氧化酶法及TBA法檢測(cè)各組結(jié)腸組織中SOD、MDA的含量。
　　結(jié)果：1、病理結(jié)果：模型組大鼠結(jié)腸標(biāo)本表現(xiàn)為腸粘膜充血、水腫、糜爛、壞死、腸壁增厚、潰瘍形成，腸腔狹窄。光鏡下可見(jiàn)粘膜局灶糜爛和潰瘍，大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，腺體破壞，結(jié)構(gòu)紊亂。用藥各組大鼠結(jié)腸標(biāo)本表現(xiàn)較模型組明顯減輕，以充血水腫為主，潰瘍較小且較淺表，光鏡下粘膜層、粘膜下層以炎性滲出為主，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度輕，腺體增生較活躍。空白對(duì)照組結(jié)腸標(biāo)本

4、肉眼觀察粘膜紋理清晰，無(wú)充血水腫及潰瘍形成，光鏡下見(jiàn)粘膜結(jié)構(gòu)完整，腺體排列整齊清晰，少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　2、RT-PCR結(jié)果：模型組結(jié)腸組織中TLR9、Myd88、NF-κB mRNA表達(dá)水平較其他各組高，（p<0.01），OMT+美沙拉嗪組中TLR9、Myd88、NF-κB mRNA較OMT組和美沙拉嗪組低表達(dá)，（p<0.05），OMT組及美沙拉嗪組兩組之間表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）。
　　3、脂質(zhì)過(guò)氧化損傷指

5、標(biāo)檢測(cè)結(jié)果：模型組結(jié)腸組織中SOD活力最低，MDA含量最高，與其他各組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01），OMT+美沙拉嗪組標(biāo)本中SOD水平較OMT組及美沙拉嗪組高表達(dá)，MDA水平較OMT組及美沙拉嗪組低表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01），OMT組及美沙拉嗪組兩組之間SOD及MDA水平相比較p>0.05，差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：1、OMT對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織中TLR9、Myd88、NF-κB mRNA的表達(dá)具有顯