腺樣囊性癌復(fù)發(fā)、侵襲、轉(zhuǎn)移特性的研究.pdf

1、目的：(1)研究影響腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma，ACC)患者預(yù)后的相關(guān)因素。(2)觀察神經(jīng)生長因子(nerve growth factor，NGF)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記物(Ki-67)在ACC組織的表達(dá)情況，并計數(shù)ACC組織中的微血管密度(MVD)，分析上述指標(biāo)與ACC復(fù)發(fā)、侵襲、轉(zhuǎn)移特性的相關(guān)性。(3)

2、探討生長因子抑制劑蘇拉明(Suramin)抑制ACC細(xì)胞生長增殖的可行性。 方法：(1)回顧性分析1988年1月至2005年10月在廣西醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院行手術(shù)治療并經(jīng)病理確診的63例．ACC患者臨床資料，采用乘積極限法(Product limit method)估計各時點(diǎn)的生存率，并繪制Kaplan-Meier生存曲線，用Log-Rank檢驗(yàn)法比較各組間的差異，采用Cox比例風(fēng)險回歸模型對影響ACC患者預(yù)后的多項(xiàng)因素進(jìn)行分析

3、。(2)以上述63例ACC患者術(shù)后病理組織為研究對象，按照患者不同的臨床表現(xiàn)、TNM分期、病理類型等指標(biāo)進(jìn)行分組，采用免疫組化S-P法染色對NGF、VEGF、Ki-67表達(dá)指標(biāo)進(jìn)行檢測，并通過CD34標(biāo)記癌組織血管內(nèi)皮細(xì)胞，計數(shù)ACC組織的微血管密度(MVD)。(3)MTT法檢測蘇拉明對腺樣囊性癌ACC-2和ACC-M細(xì)胞生長的影響，采用蛋白質(zhì)免疫印跡Western-B10t法檢測NGF與VEGF在ACC細(xì)胞中的表達(dá)情況。通過酶聯(lián)免疫檢

4、測儀(D5032型)分析MTT法檢測結(jié)果，并繪制細(xì)胞生長抑制曲線；通過Gel Doc2000電泳圖像系統(tǒng)分析Western-Blot蛋白電泳結(jié)果，分析結(jié)果采用灰度值表示，統(tǒng)計分析采用組間t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：(1)63例ACC患者術(shù)后3、5、10年的無瘤生存率分別為77.64％、68.31％、39.26％，總生存率分別為65.73％、57.17％、38.92％。Cox比例風(fēng)險回歸模型多因素分析結(jié)果顯示

5、：TNM分期、病理類型、神經(jīng)侵襲、手術(shù)方式、放/化療、局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是影響ACC患者預(yù)后的重要因素。(2)免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn)NGF、VEGF、Ki-67在ACC大部分組織中均有不同程度的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)NGF在沿神經(jīng)周圍分布的腫瘤細(xì)胞染色強(qiáng)度明顯高于遠(yuǎn)離神經(jīng)者；VEGF在有神經(jīng)侵襲組、實(shí)性型組、術(shù)后復(fù)發(fā)組的表達(dá)強(qiáng)度高于無神經(jīng)侵襲組、腺樣-管狀型組、術(shù)后無復(fù)發(fā)組；Ki-67在實(shí)性型組及術(shù)后復(fù)發(fā)組的表達(dá)高于腺樣-管狀型組及術(shù)后無復(fù)發(fā)組；MVD

6、在實(shí)性型組的計數(shù)值高于腺樣-管狀型組。(3)MTT檢測顯示ACC細(xì)胞經(jīng)蘇拉明作用后其生長受到明顯抑制，抑制強(qiáng)度呈藥物濃度依賴性；Western-B1ot結(jié)果顯示NGF與VEGF在ACC細(xì)胞的表達(dá)下降，表達(dá)量與藥物濃度密切相關(guān)，隨濃度增加而減少，與空白組相比表達(dá)水平降低。 結(jié)論：(1)TNM分期、病理類型、神經(jīng)侵襲、局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是影響ACC患者預(yù)后的危險因素，能縮短術(shù)后生存時間；手術(shù)加放/化療是保護(hù)因素，說明綜合治療具有重要