腺樣囊性癌復發(fā)、侵襲、轉移特性的研究.pdf

1、目的：(1)研究影響腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma，ACC)患者預后的相關因素。(2)觀察神經生長因子(nerve growth factor，NGF)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、增殖細胞核抗原標記物(Ki-67)在ACC組織的表達情況，并計數ACC組織中的微血管密度(MVD)，分析上述指標與ACC復發(fā)、侵襲、轉移特性的相關性。(3)

2、探討生長因子抑制劑蘇拉明(Suramin)抑制ACC細胞生長增殖的可行性。 方法：(1)回顧性分析1988年1月至2005年10月在廣西醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院行手術治療并經病理確診的63例．ACC患者臨床資料，采用乘積極限法(Product limit method)估計各時點的生存率，并繪制Kaplan-Meier生存曲線，用Log-Rank檢驗法比較各組間的差異，采用Cox比例風險回歸模型對影響ACC患者預后的多項因素進行分析

3、。(2)以上述63例ACC患者術后病理組織為研究對象，按照患者不同的臨床表現、TNM分期、病理類型等指標進行分組，采用免疫組化S-P法染色對NGF、VEGF、Ki-67表達指標進行檢測，并通過CD34標記癌組織血管內皮細胞，計數ACC組織的微血管密度(MVD)。(3)MTT法檢測蘇拉明對腺樣囊性癌ACC-2和ACC-M細胞生長的影響，采用蛋白質免疫印跡Western-B10t法檢測NGF與VEGF在ACC細胞中的表達情況。通過酶聯(lián)免疫檢

4、測儀(D5032型)分析MTT法檢測結果，并繪制細胞生長抑制曲線；通過Gel Doc2000電泳圖像系統(tǒng)分析Western-Blot蛋白電泳結果，分析結果采用灰度值表示，統(tǒng)計分析采用組間t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結果：(1)63例ACC患者術后3、5、10年的無瘤生存率分別為77.64％、68.31％、39.26％，總生存率分別為65.73％、57.17％、38.92％。Cox比例風險回歸模型多因素分析結果顯示

5、：TNM分期、病理類型、神經侵襲、手術方式、放/化療、局部復發(fā)及遠處轉移是影響ACC患者預后的重要因素。(2)免疫組化結果發(fā)現NGF、VEGF、Ki-67在ACC大部分組織中均有不同程度的表達，并發(fā)現NGF在沿神經周圍分布的腫瘤細胞染色強度明顯高于遠離神經者；VEGF在有神經侵襲組、實性型組、術后復發(fā)組的表達強度高于無神經侵襲組、腺樣-管狀型組、術后無復發(fā)組；Ki-67在實性型組及術后復發(fā)組的表達高于腺樣-管狀型組及術后無復發(fā)組；MVD

6、在實性型組的計數值高于腺樣-管狀型組。(3)MTT檢測顯示ACC細胞經蘇拉明作用后其生長受到明顯抑制，抑制強度呈藥物濃度依賴性；Western-B1ot結果顯示NGF與VEGF在ACC細胞的表達下降，表達量與藥物濃度密切相關，隨濃度增加而減少，與空白組相比表達水平降低。 結論：(1)TNM分期、病理類型、神經侵襲、局部復發(fā)及遠處轉移是影響ACC患者預后的危險因素，能縮短術后生存時間；手術加放/化療是保護因素，說明綜合治療具有重要