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文檔簡介
1、本實(shí)驗(yàn)從冠心病的易患因素高脂血癥著手,依據(jù)冠心病的發(fā)病機(jī)制,以高脂飼料配方喂養(yǎng),形成高脂血癥,在此基礎(chǔ)上,皮下注射異丙腎上腺素,形成心肌缺血的復(fù)合模型,使之更符合冠心病的發(fā)病特點(diǎn)。并采用血清學(xué)方法、放射免疫法、免疫組織化學(xué)法等研究方法來觀察活血通脈靈(HXTML)對心肌缺血損傷大鼠心肌酶、血脂、炎癥因子、黏附分子及心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)學(xué)等的改變,多層次、多角度探討HXTML防治冠心病的作用機(jī)制,為該藥的臨床應(yīng)用提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù),為冠心病患者中
2、醫(yī)中藥的臨床復(fù)方用藥治療和預(yù)防提供新的思路和方法。 目的: 探討活血通脈靈對實(shí)驗(yàn)性心肌缺血大鼠心肌損傷的保護(hù)作用機(jī)制。 方法: 將50只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為空白對照組,模型對照組,藥物對照組及活血通脈靈大劑量治療組(HXTMLmax)和活血通脈靈小劑量治療組(HXTMLmin),每組10只.實(shí)驗(yàn)前記錄肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖,檢測正常者可入選??瞻捉M普通飼料喂養(yǎng),其余各組動物高脂飼料喂養(yǎng),28天后禁食12
3、小時(shí)大鼠內(nèi)眥靜脈取血,抽查各組大鼠有顯著差異后,各治療組分別開始灌胃用藥。空白組和模型組每次給予10ml/kg生理鹽水,藥物對照組給予消心痛2.5mg/kg,用生理鹽水配成等體積混懸液,HXTMLmax組和HXTMLmin組分別給予含生藥47g/kg,23.5g/kg湯劑,以上液體按10ml/kg灌胃,每日一次,連續(xù)12天,正常飲食。隨后連續(xù)3天除空白組外,其余4組大鼠均皮下注射ISO 5mg/kg,復(fù)制心肌缺血模型,空白組皮下注射等量
4、生理鹽水,每日一次。各組均在末次皮下注射后45分鐘用20%烏拉坦5ml/kg腹腔注射麻醉,內(nèi)眥靜脈取血1-1.5ml,按試劑盒說明,分別運(yùn)用CHOD-PAP酶法、GPO-PAP酶法、CAT法測定血清總膽固醇,甘油三酯,低密度脂蛋白,高密度脂蛋白的含量,并用心電圖機(jī)標(biāo)記Ⅱ?qū)?lián)。然后斷頭取血,用全自動生化分析儀檢測血清心肌酶,即肌酸激酶(CK),其同工酶(CK-MB),乳酸脫氫酶(LDH)。通過放射免疫法檢測腫瘤壞死因子(TNF),白介素6
5、(IL-6)。取心尖部心肌組織,進(jìn)行蘇木素-伊紅(HE)染色,光鏡下觀察病理形態(tài)學(xué)改變。并采用ABC染色檢測P選擇素(P-Selectin)和L選擇素(L-Selectin)的表達(dá)量。 結(jié)果: 1、各組大鼠血脂的變化與空白組比較,模型組大鼠血脂總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)明顯升高,高密度脂蛋白(HDL-C)下降,差異顯著(P<0.01),與模型組比較,各治療組血脂的各項(xiàng)指標(biāo)都有變化,其
6、中大劑量組差異最大,藥物對照組和小劑量組差異較小,但均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。藥物對照組和小劑量組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。 2、心電圖改變 與實(shí)驗(yàn)前所做心電圖相比,空白組心電圖ST段接近等電位線,T波無明顯降低。與空白組比較,模型組ST段壓低及T波降低明顯(P<0.01),表明本次復(fù)制心肌缺血模型成功。與模型組比較,藥物對照組和中藥治療組ST段及T波壓低較小(P<0.01),其中中藥治療組較藥物對照組
7、ST段及T波壓低改善更為顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。但中藥治療組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2血清心肌酶三項(xiàng)指標(biāo)中,模型組較空白組均顯著升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與模型組比較,藥物對照組和中藥治療組三項(xiàng)指標(biāo)均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),但藥物對照組和HXTML大小劑量組三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3、血清TNF、IL-6模型組與空白組相比,TNF和IL-6水平均升高(P<
8、0.01)。與模型組比較,藥物對照組及兩個(gè)中藥治療組較模型組水平明顯降低(P<0.05或P<0.01),但藥物對照組及中藥治療組組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4、組織病理損傷空白對照組未見明顯的組織學(xué)改變;模型組以心肌大范圍灶性病變,肌纖維腫脹和斷裂,空泡變性,間質(zhì)水腫,炎細(xì)胞浸潤為主;藥物對照組和HXTMLmin組較模型組改變輕微,以肌纖維腫脹,局灶性斷裂,少量空泡變性和炎細(xì)胞浸潤為主;HXTMLmax組的病理改變
9、最輕,多為炎細(xì)胞浸潤。 5、P-Selectin、L-Selectin表達(dá)與空白組比較,模型組大鼠P-Selectin和L-Selectin表達(dá)均明顯升高,差異顯著(P<0.05或P<0.01),與模型組比較,各治療組都有不同程度的降低,其中大劑量組差異最大,藥物對照組和小劑量組差異較小,但均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。藥物對照組和小劑量組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。 結(jié)論: 活血通脈靈對大鼠心肌缺血
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