Salusin-β對(duì)大鼠急性心肌缺血的保護(hù)作用.pdf

1、目的：心血管活性物質(zhì)是維持人體生命活動(dòng)最重要的物質(zhì)基礎(chǔ)，研究和揭示生物活性物質(zhì)的功能是生命科學(xué)的一個(gè)重要課題。Shichiri等于2003年發(fā)現(xiàn)了由28個(gè)和20個(gè)氨基酸殘基組成的活性多肽，分別稱之為salusin-α和salusin-β。Salusins由扭轉(zhuǎn)應(yīng)力張力基因TOR2A mRNA(一種編碼扭轉(zhuǎn)應(yīng)力張力家族蛋白的基因)經(jīng)選擇性剪接翻譯而來，TOR2A含有5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子，salusins 在血管、腎臟等人體的大多數(shù)組織內(nèi)

2、均可合成和表達(dá)，salusins可以刺激靜止期的血管平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增殖，通過刺激細(xì)胞外鈣進(jìn)入平滑肌細(xì)胞而增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平，并誘導(dǎo)如c-myc和 c-fos等生長(zhǎng)相關(guān)基因表達(dá)。上述結(jié)果提示 salusins 可能是新的心血管調(diào)節(jié)肽。為了探明salusins是否具有抗心肌缺血損傷作用及其機(jī)制，本工作在整體大鼠心肌缺血模型，觀察salusin-β對(duì)大鼠急性心肌缺血性心律失常、心肌梗死面積、血流動(dòng)力學(xué)的影響，以明確 salusin

3、-β是否具有抗心肌缺血損傷的作用。 方法：雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只，分別為假手術(shù)組、LAD結(jié)扎組(模型組)、salusin-β預(yù)處理組（salusin-β5、10、20nmol/kg+LAD結(jié)扎組）。假手術(shù)組開胸冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）穿線不結(jié)扎，結(jié)扎組大鼠距LAD起始部約2.5～3mm處結(jié)扎LAD，造成大鼠急性心肌缺血，salusin-β預(yù)處理組于結(jié)扎前15min內(nèi)經(jīng)左下肢股靜脈插管，注射salusin-β，應(yīng)用R

4、M6240BD型多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)記錄120min缺血期內(nèi)大鼠心率（HR）、平均動(dòng)脈血壓（MAP）、左心室收縮壓（LVSP）、左心室舒張末期壓（LVEDP）、左心室內(nèi)壓最大上升速率（＋dp/dtmax）、左心室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）及心律失常發(fā)生情況。LAD 結(jié)扎120min時(shí)通過伊文氏蘭(Evans Blue)結(jié)合氯化2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色，切片掃描判斷缺血120min時(shí)心肌梗死情況。根據(jù)心功能的

5、變化、心律失常計(jì)數(shù)及評(píng)分和心肌梗死面積的變化，評(píng)估salusin-β對(duì)大鼠急性心肌缺血性損傷的影響。 結(jié)果：①LAD 結(jié)扎后1min、5min、10min、15min、20min、25min、30min，模型組、各salusin-β預(yù)處理組與假手術(shù)組相比，HR變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P>0.05）。LAD結(jié)扎后，與假手術(shù)組相比，模型組、salusin-β5、10nmol/kg 預(yù)處理組 30min 內(nèi)以及salusin-β20nmol

6、/kg 預(yù)處理組結(jié)扎后 1～20min的采集點(diǎn)，MAP、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明顯降低（P<0.05或P<0.01），LVEDP明顯升高（P<0.05或P<0.01）；salusin-β20nmol/kg 預(yù)處理組與假手術(shù)組相比，結(jié)扎后25min，LVSP、LVEDP、±dp/dtmax變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。Salusin-β10nmol/kg 預(yù)處理組與模型組相比，LAD結(jié)扎后25min，LVSP

7、、+dp/dtmax、-dp/dtmax明顯升高（P<0.05），LVEDP明顯降低（P<0.01）；salusin-β20nmol/kg 預(yù)處理組與模型組相比，結(jié)扎后5min，LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明顯升高（P<0.05），LVEDP明顯降低（P<0.01）。LAD結(jié)扎后，salusin-β5nmol/kg預(yù)處理組與模型組相比，僅LVEDP在各個(gè)采集點(diǎn)明顯降低（P<0.05），MAP、LVSP、±dp/dtm

8、ax變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。Salusin-β10nmol/kg 預(yù)處理組與salusin-β5nmol/kg 預(yù)處理組相比，MAP、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax在15min后明顯升高（P<0.05或P<0.01），LVEDP變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。Salusin-β20nmol/kg 預(yù)處理組與salusin-β5nmol/kg 預(yù)處理組相比，MAP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明顯升

9、高（P<0.05或P<0.01）；LVEDP明顯降低（P<0.05）。Salusin-β20nmol/kg 預(yù)處理組與salusin-β10nmol/kg預(yù)處理組相比，MAP變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），LVSP30min明顯升高（P<0.05），+dp/dtmax 25min后明顯升高（P<0.05），-dp/dtmax 15min后明顯升高（P<0.05）；LVEDP結(jié)扎后30min內(nèi)明顯降低（P<0.05）。②結(jié)扎LAD后，誘

10、發(fā)嚴(yán)重缺血性心律失常，心律失常分為：分為單發(fā)室性早搏(single premature ventricular contraction，Single PVC)、室早連發(fā)(salvo)、室性心動(dòng)過速(ventricular tachycardia,VT)和室性纖維性顫動(dòng)(ventricular fibrillation,VF)。結(jié)扎組全組8只大鼠均發(fā)生單發(fā)室性早搏PVC(158±8)，室早連發(fā)Salvos(60±6)，室性心動(dòng)過速V T計(jì)

11、數(shù)(1384±35)，各項(xiàng)計(jì)數(shù)均很高，PVC總計(jì)數(shù)(1689±32），VT的總時(shí)程(173±13)也很高，室性纖維性顫動(dòng)VF不可逆死亡3只，心律失常評(píng)分AS（5.3±1.1）。Salusin-β5nmol/kg、10nmol/kg、20nmol/kg預(yù)處理組隨藥物劑量加大，各類心律失常發(fā)生的數(shù)量減少，時(shí)程縮短。Salusin-β20nmol/kg預(yù)處理組也只發(fā)生了PVC（78±7），Salvos(19±5)，VT計(jì)數(shù)（33±13），PV

12、C總計(jì)數(shù)(120±15），VT總時(shí)程（2±5），AS（1.2±0.6）與結(jié)扎組相比，差異顯著（P<0.05或P<0.01）。③大鼠缺血120min心肌Evans Blue結(jié)合TTC染色，之后用4％多聚甲醛溶液固定24h，計(jì)算梗死面積。由于取用同一公司、相同種系（SD)、相同體重大鼠，而且人為控制每只大鼠的結(jié)扎位置盡量標(biāo)準(zhǔn)化，故行結(jié)扎后大鼠的的心肌正常區(qū)（染色后為藍(lán)色區(qū)域），理想狀態(tài)下，所占百分比差異較小。實(shí)驗(yàn)中模型梗死面積百分比的取值為

13、心肌梗死區(qū)（白色區(qū)域）/心肌缺血邊緣區(qū)（紅色區(qū)域）。模型組的心肌梗死面積百分比(60.1±5.9)％；salusin-β5nmol/kg 預(yù)處理組心肌梗死面積百分比（29.0±4.8）％；salusin-β10nmol/kg 預(yù)處理組心肌梗死面積百分比（13.6±4.6）％；salusin-β20nmol/kg預(yù)處理組心肌梗死面積百分比（4.7±2.0）％。各salusin-β預(yù)處理組與模型組相比，心肌梗死有不同程度的改善，各salus