去鐵胺對急性心肌缺血大鼠心肌組織的保護作用.pdf

1、目的:初步探討去鐵胺(DFO)干預對急性心肌缺血大鼠心肌組織梗死面積、微血管密度(microvessel density,MVD)以及HIF-1α、VEGF表達的影響,為DFO在心血管疾病的臨床應用中提供理論依據(jù)。
　　方法:1.實驗分組:SPF級健康SD大鼠84只,雌雄各半,體重180-220g,①正常對照組(Nor組),12只不予處理;②假手術組(Sham組),24只(備30只),予在左冠狀動脈前降支穿線,不結扎;③心肌梗死+

2、生理鹽水組(MI組),24只(備35只),術前24小時予腹腔注射生理鹽水(200mg/kg),結扎左冠狀動脈前降支;④心肌梗死+DFO組(DFO組),24只(備35只),術前24小時予腹腔注射DFO(200mg/kg),結扎左冠狀動脈前降支。2、心電圖檢查:采用標準的肢體導聯(lián)于術前和術后10min分別監(jiān)測ECG,標準電壓1mV=10mm,紙速為25mm/s。3、術后第7天以脫臼法處死SD大鼠,并計算心肌梗死面積。4、免疫組化法測MVD。

3、5、免疫組化法測定HIF-1α蛋白、VEGF蛋白的表達。6、逆轉錄聚合酶鏈法(RT-PCR)檢測HIF-1αmRNA、VEGFmRNA的相對表達。
　　結果:1.心電圖觀察:術前均未見ST段抬高,術后10min Sham組ECG示部分出現(xiàn)Ⅰ、Ⅱ導聯(lián)R波振幅降低,ST段升高,不超過0.2mV, MI組、MSCs組大鼠ECG示Ⅰ、Ⅱ、avL導聯(lián)R波振幅降低,J點上移,ST段呈弓背向上,升高超過0.2mV;2.術后第7天以脫臼法處死SD

4、大鼠,并計算心肌梗死面積發(fā)現(xiàn)DFO組梗死面積百分比明顯小于MI組梗死面積百分比(P<0.01)。3.免疫組化測MVD示:Nor組、Sham組之間的心肌MVD未見明顯差別(P>0.05);Nor組、Sham組MVD值均明顯低于MI組(P<0.01);DOF組MVD值明顯高于MI組(P<0.01)4.免疫組化法測定HIF-1α、VEGF蛋白的表達:Nor組、Sham組中HIF-1α蛋白幾乎不表達,而VEGF蛋白則有少量表達,兩者之間未見明顯

5、差異(P>0.05);MI組、DFO組中HIF-1α蛋白表達明顯,測灰度值示DFO組的灰度值明顯低于MI組(P<0.01);MI組、DFO組中VEGF蛋白表達明顯,測灰度值示DFO組的灰度值明顯低于MI組(P<0.01)。5.RT-PCR檢測HIF-1αmRNA、VEGFmRNA的相對表達示:Nor組、Sham組的HIF-1αmRNA未見明顯表達,而Nor組、Sham組的VEGFmRNA有較低表達,兩者無明顯差異(P>0.05);MI組

6、、DFO組的HIF-1αmRNA均有明顯表達,其中DFO組的HIF-1α/β-actin值明顯大于MI組的值(P<0.01);MI組、DFO組的VEGFmRNA均有明顯表達,其中DFO組的VEGF/β-actin值明顯大于MI組的值(P<0.05)。
　　結論:1.DFO預干預可以減少急性心肌缺血大鼠心肌梗死面積。2.DFO預干預可以增加急性心肌缺血大鼠缺血心肌的微血管密度。3.HIF-1αmRNA在正常大鼠心肌組織中幾乎不表達,