腹腔鏡及開腹手術(shù)前后血清對(duì)ECV304生成內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響.pdf

1、目的：通過觀察婦科腹腔鏡手術(shù)及開腹手術(shù)患者手術(shù)前后血清中eNOS含量的變化，并將患者血清作用于體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304)，觀察細(xì)胞形態(tài)有無變化及合成eNOS的情況，探討婦科腹腔鏡手術(shù)的特殊因素是否會(huì)增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，從而增加術(shù)后靜脈血栓發(fā)生的危險(xiǎn)性。
　　 方法：
　　 預(yù)實(shí)驗(yàn)：用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法(ELISA)測(cè)定實(shí)驗(yàn)前期8名患者的未滅活血清及未滅活血漿中eNOS的含量，確定未滅活血清為實(shí)驗(yàn)標(biāo)

2、本來源。
　　 (1)選取行腹腔鏡全子宮切除術(shù)19例為研究組，經(jīng)腹行全子宮切除術(shù)19例為對(duì)照組，于術(shù)前及手術(shù)結(jié)束時(shí)抽取靜脈血測(cè)定內(nèi)皮型一氧化氮合酶的含量，觀察腹腔鏡手術(shù)及開腹手術(shù)對(duì)eNOS的影響。
　　 (2)將腹腔鏡全子宮切除術(shù)及開腹全子宮切除術(shù)患者(各8例)術(shù)前術(shù)后血清做為干預(yù)介質(zhì)作用于體外培養(yǎng)的ECV304，觀察細(xì)胞形態(tài)的改變及采用ELISA法測(cè)定細(xì)胞液中內(nèi)皮型一氧化氮合酶的含量變化。研究結(jié)果計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)、單

3、因素方差分析、樣本均數(shù)方差分析(F檢驗(yàn))，并采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.同一患者手術(shù)前后未滅活血清及未滅活血漿中內(nèi)皮型一氧化氮合酶含量的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.(1)研究組及對(duì)照組的本身術(shù)前及術(shù)后的比較顯示，兩組術(shù)后eNOS的含量均有不同程度的下降，但是差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (2)比較研究組及對(duì)照組手術(shù)前后eNOS含量的差值，組間

4、差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.(1)不加干預(yù)血清的空白對(duì)照組ECV304細(xì)胞培養(yǎng)2h、6h、12h、24h后，其細(xì)胞培養(yǎng)液中eNOS的含量變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (2)研究組及對(duì)照組術(shù)前術(shù)后血清加入細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)2h、6h、12h、24h后，其上清液中的eNOS含量較干預(yù)前血清中基礎(chǔ)eNOS的含量稍微下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P＞0.05)。比較作用不同的時(shí)間各組eNOS的含的量，組

5、間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (3)研究組術(shù)前術(shù)后血清作用于ECV304細(xì)胞2h、6h、12h、24h后，經(jīng)過相同的作用時(shí)間，比較術(shù)前術(shù)后兩組血清干預(yù)的細(xì)胞培養(yǎng)液中的eNOS的含量，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (4)對(duì)照組術(shù)前術(shù)后血清作用于ECV304細(xì)胞2h、6h、12h、24h后，經(jīng)過相同的作用時(shí)間，比較術(shù)前術(shù)后兩組血清干預(yù)的細(xì)胞培養(yǎng)液中的eNOS的含量，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

6、
　　 (5)ECV304細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，細(xì)胞多呈梭形和不規(guī)則三角形，具有鵝卵石樣的單層生長(zhǎng)的特點(diǎn)。細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，境界清楚；核呈圓形或橢圓形，胞漿豐富，有小突起自細(xì)胞內(nèi)向外伸出，形成纖維絲，胞膜完整，胞質(zhì)透明，有細(xì)胞堆積現(xiàn)象。ECV304細(xì)胞具有一般內(nèi)皮細(xì)胞的某些特征。經(jīng)干預(yù)血清作用24h后，倒置相差顯微鏡下觀察研究組及對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)，均有不同程度的細(xì)胞變圓及脫落現(xiàn)象。
　　 結(jié)論：
　　 1.未滅活血清更適合作