HMGB1在電針內(nèi)關(guān)穴對心肌缺血再灌注損傷保護作用中的機制研究.pdf

1、目的:大量證據(jù)顯示，自主神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)參與了電針內(nèi)關(guān)穴在心肌缺血再灌注損傷中的保護作用。缺血發(fā)生后，壞死的心肌細胞釋放大量的高遷移率族蛋白(highmobility group box-1，HMGB1)，從而引起炎性瀑布反應(yīng)并加重再灌注期的心肌損傷。在內(nèi)毒素血癥和心肌梗死的疾病模型中，HMGB1的釋放和自主神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)緊密相聯(lián)，因此電針的心肌保護作用可能是通過干預(yù)自主神經(jīng)系統(tǒng)的功能，進而調(diào)節(jié)HMGB1的釋放而實現(xiàn)。本研究旨在探究電針內(nèi)

2、關(guān)穴、自主神經(jīng)系統(tǒng)及HMGB1三者在心肌缺血再灌注條件下的聯(lián)系，從而進一步深入認識電針內(nèi)關(guān)穴心肌保護作用的內(nèi)在機制。
　　方法:第一部分中C57/BL6雄性小鼠（8-10周齡）分別接受電針內(nèi)關(guān)穴(PC6)、非穴位(NA)以及電針內(nèi)關(guān)穴復(fù)合人重組HMGB1(PC6+rHMGB1)、抗HMGB1抗體(PC6+anti-HMGB1)預(yù)處理后，將冠狀動脈左前降支結(jié)扎30min并松開完成再灌注。分別測量心肌組織中HMGB1的表達量，炎性因子

3、(如TNF-α、IL-6)以及相應(yīng)的組織損傷指標(biāo)(cTnⅠ)。隨后，在第二、三部分中通過迷走神經(jīng)切斷術(shù)、化學(xué)性交感神經(jīng)阻滯以及相應(yīng)的受體阻滯劑等手段探究自主神經(jīng)（迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)）在電針對IR及HMGB1的調(diào)節(jié)作用中的參與情況。第四部分采用原代心肌細胞的氧糖剝奪模型(oxygen-glucose deprivation)模擬在體心肌缺血，分別加入乙酰膽堿(ACh)、去甲腎上腺素(NE)模擬迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)的作用，并輔以相應(yīng)受體阻滯劑

4、，進一步驗證自主神經(jīng)及相應(yīng)神經(jīng)受體的作用。
　　結(jié)果:電針內(nèi)關(guān)預(yù)處理能顯著減輕IR引起的炎性因子TNF-α、IL-6的表達，減少心肌組織中HMGB1的釋放，有效改善了心肌組織損傷，而電針非穴位則無顯著心肌保護作用;rHMGB1削弱電針內(nèi)關(guān)的心肌保護作用，而anti-HMGB1抗體則加強了電針的心肌保護作用。電針內(nèi)關(guān)預(yù)處理的心肌保護作用依賴迷走神經(jīng)及其煙堿型膽堿能受體(nAChRs)，尤其是α7-煙堿型膽堿能受體（α7-nAChRs