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文檔簡介
1、目的:利用基因芯片技術,分析溫陽消飲法對胸腔積液大鼠胸膜基因表達的調(diào)控作用。
方法:48只雄性SD大鼠適應性飼養(yǎng)3天后,隨機分為A組(40只)與空白對照組(8只)。A組動物以戊巴比妥鈉麻醉后,采用1%λ-角叉菜膠溶液進行右側胸膜腔注射。24h后,運用CR數(shù)字成像系統(tǒng)觀察胸部X光片,篩選出胸腔積液明顯的大鼠,作為造模成功的動物備用。將造模成功的動物隨機分為:溫陽消飲組(10只),每日1次溫陽消飲法代表方水煎液灌胃(5ml/kg)
2、;模型組(9只),每日1次生理鹽水灌胃(5ml/kg)。空白對照組(8只),每日1次生理鹽水灌胃(5ml/kg)。連續(xù)給藥4天后,動物進行安樂死。每組取3只動物的右側臟層和壁層胸膜,利用Agilent單通道表達譜芯片對胸膜組織基因表達情況進行分析。
結果:
?壁層胸膜組織
模型組與空白對照組、溫陽消飲組與模型組差異表達基因涉及多個生物學過程和信號通路。在造模因素作用下,基因Fgd4、Mef2a、Fhl3、D
3、yrk2、Slc24a6、Pbrm1、LOC498368、Tp53i11、Rcan3、Hapln4、Abi1和Hlx表達上調(diào),在中藥干預下表達下調(diào);Nme7、Pold2、Klk1l和Fkbp5在造模條件下表達下調(diào),用藥后上調(diào)。
?臟層胸膜組織
模型組與空白對照組、溫陽消飲組與模型組差異表達基因涉及多個生物學過程和信號通路。在造模因素作用下,基因Rhoa、RGD1306349、Nsd1、Figf、Brd4、Crebbp
4、、Sos2、Irf2、Brd2、Tspyl2、Eif4g2、Lcor、Isy1、Sf3a3、Msl2l1、Myo9a、Papolg、Vasp、Pdcd7、Zbtb11、RGD1559904、Csnk1g1、Leng8、Ddx10、Arhgef3、Smg6、Zfat、Tm9sf3、Otud5和Chd6表達上調(diào),在溫陽消飲法代表方干預下表達下調(diào);Ksr1、Slc25a27、Ptrf、Efemp1、RGD1563319、Cyb5r3、Gpr1
5、35、Polr3gl、Kcna5、Ugp2、Acad11和Btbd11在造模條件下表達下調(diào),用溫陽消飲法代表方治療后上調(diào)。
結論:前期研究發(fā)現(xiàn),溫陽消飲法有助于λ-角叉菜膠誘導的豚鼠胸腔積液的吸收。本實驗表明,其機制可能與苓桂術甘湯合葶藶大棗瀉肺湯給藥調(diào)控多個生物學過程及信號通路有關。本研究從基因水平揭示了溫陽消飲法的部分機制:①溫陽消飲法可下調(diào)壁層胸膜炎癥促進基因Mef2a、凋亡誘導基因Dyrk2和Tp53i11表達,改善炎
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