參芪復(fù)方對(duì)KKAy小鼠糖尿病大血管病變差異基因表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本研究通過(guò)觀察具有養(yǎng)陰益氣、活血化瘀功效的參芪復(fù)方對(duì)糖尿病大血管病變KKAy小鼠的主動(dòng)脈病理形態(tài)的影響，并應(yīng)用基因芯片技術(shù)尋找參芪復(fù)方防治糖尿病大血管病變的分子靶點(diǎn)，探討參芪復(fù)方防治糖尿病大血管病變的生物學(xué)作用及其機(jī)理，為中藥防治糖尿病大血管病變提供分子理論依據(jù)。
　　方法：66只隨機(jī)血糖2次≥13.9mmol·L-1的18-20周齡雄性KKAy小鼠隨機(jī)分成4組：KKAy組（n=15）；糖尿病大血管病變模型組（簡(jiǎn)稱(chēng)模型組，n

2、=15）；參芪復(fù)方組（n=15）；羅格列酮組（n=15）。正常C57BL/6J小鼠（n=15）做對(duì)照組。其中模型組、參芪復(fù)方組及羅格列酮組予以一氧化氮合成酶（eNOS）抑制劑（L-NAME）0.2mg·ml-1·d-1加入飲用水中進(jìn)行造模，連續(xù)造模8周。正常組喂普通飼料，各實(shí)驗(yàn)組KKAy小鼠喂高脂飼料。造模同時(shí)給予藥物治療，正常組、KKAy組、模型組均按10ml·kg-1·d-1灌服生理鹽水，中藥組按14.4g·kg-1·d-1灌服參芪

3、復(fù)方浸膏，羅格列酮組按1.33mg·kg-1·d-1灌服羅格列酮懸液。實(shí)驗(yàn)期間觀察動(dòng)物一般狀況、飲水量、攝食量，體重變化，監(jiān)測(cè)隨機(jī)血糖。實(shí)驗(yàn)8周后處死小鼠，檢測(cè)各組空腹血糖、胰島素、血脂水平， HE染色對(duì)腹主動(dòng)脈進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，借助基因芯片技術(shù)對(duì)胸主動(dòng)脈組織進(jìn)行基因表達(dá)譜檢測(cè)，篩選出差異表達(dá)基因，進(jìn)行GO注釋?zhuān)琍athway分析，解釋生物學(xué)意義。
　　結(jié)果：參芪復(fù)方組一般狀況優(yōu)于模型組，飲水量較模型組減少，體重較模型組下降，血糖、

4、血脂較模型組降低。參芪復(fù)方組與模型組差異表達(dá)基因，經(jīng)GO注釋、Pathway分析，主要涉及細(xì)胞命運(yùn)確定、細(xì)胞定位、大分子代謝過(guò)程和胰島素信號(hào)通路、脂肪細(xì)胞因子信號(hào)通路、半胱氨酸和蛋氨酸代謝通路；涉及到Kdr、FGFR4、Met、AMPK基因。
　　結(jié)論：參芪復(fù)方可以改善糖尿病大血管病變KKAy小鼠的一般狀態(tài)，減少模型小鼠的飲水量，降低模型小鼠體重，改善脂代謝紊亂，減輕模型小鼠血管內(nèi)皮損傷，延緩糖尿病動(dòng)脈硬化的進(jìn)展。其作用機(jī)理可能是