參芪復(fù)方中活血法的早期運(yùn)用對(duì)KKAy小鼠糖尿病大血管病變差異表達(dá)miRNAs影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本研究通過(guò)對(duì)參芪復(fù)方及其活血組分早期運(yùn)用的研究，旨在從整體水平、細(xì)胞水平、分子水平初步探討參芪復(fù)方中活血組分早期運(yùn)用的合理性與科學(xué)性，為在糖尿病大血管病變的防治中早期使用活血法提供理論依據(jù)。
　　方法：50只隨機(jī)血糖2次≥13.9mmol?L-1的7-8周齡雄性KKAy小鼠隨機(jī)分成5組：空白組（n=10）；參芪復(fù)方組（簡(jiǎn)稱復(fù)方組，n=10）；活血組（n=10）；阿托伐他汀組（簡(jiǎn)稱他汀組，n=10）；模型組（n=10）。適應(yīng)性

2、飼養(yǎng)1周后，空白組予以普通飼料和滅菌純水；參芪復(fù)方組、活血組、他汀組、模型組每日給予一氧化氮合成酶抑制劑——L-NAME（0.2mg·ml-1·d-1），加入飲用水中，同時(shí)給予高指飼料進(jìn)行造模，連續(xù)造模35天，建立糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化模型。在造模的同時(shí)給予藥物治療，空白組、模型組均按10ml/kg·d灌服生理鹽水，參芪復(fù)方組14.4g/kg·d、活血組按2.7 g/kg·d灌服浸膏，他汀組按3.2mg/kg·d灌服阿托伐他汀懸液。實(shí)驗(yàn)期間

3、觀察動(dòng)物一般狀況、飲水量、攝食量，監(jiān)測(cè)隨機(jī)血糖。實(shí)驗(yàn)5周后處死小鼠，檢測(cè)各組空腹血糖、血脂水平、超敏C反應(yīng)蛋白，HE染色對(duì)腹主動(dòng)脈進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，應(yīng)用Agilent miRNA芯片技術(shù)平臺(tái)對(duì)腹主動(dòng)脈組織的miRNA表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，篩選出差異表達(dá)miRNAs；并利用TargetScan數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)其靶基因，進(jìn)一步對(duì)靶基因進(jìn)行GO和Pathway等生物信息學(xué)分析，以深入了解miRNAs的調(diào)控機(jī)制和生物學(xué)功能。
　　結(jié)果：參芪復(fù)方組與活

4、血組一般狀況均優(yōu)于模型組，血糖、LDL-C、TG、TC、hs-CRP較模型組降低，HDL-C高于模型組。活血組與模型組差異表達(dá)的miRNAs，經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)靶基因后，再經(jīng)GO注釋、Pathway分析，主要涉及細(xì)胞命運(yùn)的確定、改善應(yīng)激反應(yīng)和細(xì)胞黏附3個(gè)生物學(xué)過(guò)程和調(diào)控肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架、表皮生長(zhǎng)因子信號(hào)通路、p38MAPK信號(hào)通路有關(guān)。
　　結(jié)論：參芪復(fù)方中活血組分的早期運(yùn)用可以改善糖尿病大血管病變KKAy小鼠的一般狀態(tài)，改善脂代謝紊亂