養(yǎng)陰益氣活血法調(diào)控MAPK信號通路阻斷糖尿病大血管病變GK大鼠“代謝記憶”的實驗研究.pdf

1、目的：本研究從氧化應激為入口，觀察不同時間窗下具有養(yǎng)陰益氣、活血化瘀功效的參芪復方對糖尿病大血管病變GK大鼠血糖、血清CHOL、8-iso-PGF2α；胸主動脈勻漿SOD、MDA；胸主動脈病理形態(tài)、細胞凋亡的影響，進行量-時-效關系分析，推測其可能通過抑制氧化應激、阻斷“代謝記憶”途徑來保護大血管。并應用基因芯片技術尋找參芪復方防治糖尿病大血管病變的分子靶點，探討?zhàn)B陰益氣活血法阻斷“代謝記憶”的生物學作用及其機理，為臨床推廣中醫(yī)藥防治糖

2、尿病大血管病變提供理論依據(jù)。
　　方法：160只GK大鼠適應性飼養(yǎng)1周后，依據(jù)隨機血糖水平由高到低排列編號，隨機分為模型組、參芪復方高劑量組(參高組)、參芪復方中劑量組(參中組)、參芪復方低劑量組(參低組)、二甲雙胍組(西藥組)，每組32只，給予高脂飼料飼養(yǎng)；Wistar組(空白組)32只給予普通飼料飼養(yǎng)；連續(xù)喂養(yǎng)12周，建立糖尿病“代謝記憶”模型。造模完成后，模型組和空白組給予5ml/kg.d生理鹽水灌服，參高組給予2.88g/

3、kg.d參芪復方浸膏灌服，參中組給予1.44g/kg.d參芪復方浸膏灌服，參低組給予0.72g/kg.d參芪復方浸膏灌服，西藥組給予0.1g/kg.d二甲雙胍灌服，治療干預16周。實驗期間從整體水平觀察各組大鼠的一般情況，監(jiān)測空腹血糖變化；各組大鼠分別在灌胃后第8、16周末處死，檢測血清CHOL、胸主動脈勻漿SOD、MDA等指標；從組織水平，檢測胸主動脈細胞凋亡情況，HE染色對胸主動脈進行形態(tài)學觀察；觀察不同時間窗下，不同干預方式對模型

4、大鼠“代謝記憶”的影響效果。借助基因芯片技術對胸主動脈組織進行基因表達譜檢測，篩選出差異表達基因，進行GO注釋，Pathway分析，解釋生物學意義。
　　結(jié)果：參中組的作用優(yōu)于參高組和參低組，能夠明顯改善GK大鼠的一般狀況、血糖、血脂、氧化應激指標、胸主動脈病理形態(tài)及細胞凋亡。參中組與模型組差異表達基因，經(jīng)GO注釋、Pathway分析，主要涉及大分子代謝過程、細胞死亡、信號轉(zhuǎn)導、細胞遷移和MAPK信號通路、刺猬信號轉(zhuǎn)導通路、Not

5、ch信號通路、胰島素信號轉(zhuǎn)導等通路；涉及到Csnk1d、Lama4、Elavl1、Abi1、Anxa1、Nsg1等基因。
　　結(jié)論：參中組可以更好地改善糖尿病大血管病變GK大鼠的一般狀態(tài)，降低血糖，改善脂代謝紊亂，減輕氧化應激，保護大鼠血管內(nèi)皮損傷，阻斷“代謝記憶”。其作用機理可能是通過調(diào)控大分子代謝過程、細胞死亡、信號轉(zhuǎn)導、細胞遷移和MAPK信號通路、刺猬信號轉(zhuǎn)導通路、Notch信號通路、胰島素信號轉(zhuǎn)導等通路及Csnk1d、La