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文檔簡介
1、目的:研究異基因造血干細胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)前后外周血NK細胞1-磷酸鞘氨醇受體5(sphingosine-1-phosphate receptor 5,S1PR5)表達的變化,探討S1PR5表達量變化與急性移植物抗宿主?。╝cute graft-versus-host disease,aGVHD)發(fā)生的關系。
方
2、法:(1)密度梯度離心法分離17例動員前供者及相應移植后1個月患者外周血單個核細胞;(2)采用miniMACS磁珠分選系統(tǒng)分離純化allo-HSCT供者及移植后1個月患者外周血NK細胞,流式細胞術檢測分選后CD56+CD3NK細胞純度:(3)微量RNA提取試劑盒提取NK細胞總RNA;(4)采用逆轉錄試劑盒將NK細胞RNA逆轉錄成cDNA;(5)通過實時定量PCR技術檢測allo-HSCT供者及移植后1個月患者外周血NK細胞S1PR5mR
3、NA表達變化,并觀察這種變化與患者發(fā)生aGVHD的關系。
結果:(1)通過miniMACS磁珠分選系統(tǒng)獲得17例allo-HSCT供者及患者外周血高純度NK細胞;(2)17例患者中有10例移植后1個月外周血NK細胞S1PR5 mRNA表達較相應供者降低,7例升高;總體上看,移植前后S1PR5表達變化存在較大的個體差別,差異無統(tǒng)計學意義;(3)9例發(fā)生aGVHD的患者中,有7例移植后1個月外周血NK細胞S1PR5 mRNA水
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