CIK累贅胞聯(lián)合順鉑對胃癌耐順鉑細(xì)胞株SCC-7901-DDP的體外殺傷作用的實驗研究.pdf

1、目的：探討細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine-induced killer, CIK)聯(lián)合順鉑對胃癌耐順鉑細(xì)胞株的體外殺傷作用。
　　 方法：
　　 ①利用體外培養(yǎng)胃癌耐順鉑細(xì)胞株SGC-7901/DDP，采用MTT比色法觀察不同濃度的CIK細(xì)胞、順鉑以及兩者聯(lián)合對胃癌耐順鉑細(xì)胞株的生長抑制作用；
　　 ②利用RT-PCR法檢測CIK細(xì)胞及CIK細(xì)胞聯(lián)合順鉑作用后其耐藥基因（multidrug resist

2、ance gene1, mdr-1）的表達(dá)情況；
　　 ③利用Western blot法檢測CIK細(xì)胞及CIK細(xì)胞聯(lián)合順鉑作用后其耐藥蛋白(p-glycoprotein, P-gp)的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 ①M(fèi)TT法觀察到單獨應(yīng)用DDP后，SGC-7901/DDP細(xì)胞生長抑制率明顯低于SGC-7901細(xì)胞，IC50為33.42μg/ml,RI為1.73。單獨應(yīng)用CIK細(xì)胞后，隨其效靶比的增大，對SGC-

3、7901/DDP細(xì)胞的抑制呈上升趨勢，與SGC-7901細(xì)胞相比，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。聯(lián)合用藥后，使SGC-7901/DDP的生長明顯受到抑制，上升趨勢更加明顯(P＜0.05)，殺傷率最大達(dá)（86.11±0.65）％。同時，DDP對SGC-7901/DDP細(xì)胞的IC50為23.78μg/ml,RF為1.41。
　　 ②RT-PCR法顯示，單獨使用CIK細(xì)胞后，mdr-1基因mRNA的表達(dá)下降，且隨著效靶比的增大而降低，

4、最大效靶比(20：1)時，mRNA表達(dá)量為(o.64±0.07)，下降約22％，與SGC-7901/DDP細(xì)胞相比，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。聯(lián)合用藥后，mdr-1基因mRNA的表達(dá)進(jìn)一步下降，聯(lián)合80μg/mlDDP時，mRNA表達(dá)量為(0.41±0.03)，下降約44％。
　　 ③Western blot法顯示，CIK細(xì)胞組、CIK細(xì)胞聯(lián)合DDP組P-gp蛋白量表達(dá)減少，聯(lián)合用藥后細(xì)胞P-gp蛋白的表達(dá)較單獨用藥組下降，