NK、T混合淋巴細胞與順鉑聯(lián)合對乳腺癌細胞株體外殺傷研究.pdf

1、[背景與目的]1987年Fowlkes等首先在小鼠胸腺內(nèi)發(fā)現(xiàn)同時表達TCRVαβ和NK1.1抗原的NKT細胞(natural killer T cells)，它與一般T細胞不同之處在于，NKT細胞只識別由細胞表面CD1 d分子遞呈的脂類抗原。其天然配體不明。NKT細胞被激活后還可分化成具有細胞毒性和殺傷活性的效應(yīng)細胞，在抗腫瘤免疫、保護性免疫應(yīng)答及免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。研究表明，惡性腫瘤的發(fā)生與人體免疫力下降有關(guān)，化療藥物可導(dǎo)致人體免

2、疫抑制力下降，能否利用NKT細胞的細胞毒及免疫調(diào)節(jié)中作用來達到抗腫瘤的效果成為人們關(guān)注的熱點，研究NKT細胞與化療藥物對腫瘤細胞的作用在臨床中有著現(xiàn)實意義。NK、T混合淋巴細胞(NKTm，以NKT細胞亞群為主)聯(lián)合化療藥是產(chǎn)生對腫瘤的協(xié)同還是拮抗作用，兩者如何序貫使用才能對腫瘤細胞產(chǎn)生最佳的抑制作用等問題是首先要考慮到問題。在此基礎(chǔ)上才能繼續(xù)探討產(chǎn)生此種作用的具體機制。本研究采用我科實驗室培養(yǎng)的NKTm聯(lián)合順鉑，作用于乳腺癌細胞系MDA

3、-MB-231，觀察免疫細胞同化療藥物的作用，及兩者在不同時序下聯(lián)合對乳腺癌細胞的作用。通過對結(jié)果的分析，探討在體外情況下NKTm細胞對乳腺癌細胞系的抑制作用，了解在細胞毒藥物的作用下，免疫細胞與腫瘤細胞系在自身生存及相互作用有何改變，為臨床細胞免疫治療同化療聯(lián)合時機提供一些思路。
　　 [方法]收集并選定我科實驗室培養(yǎng)的具有一定殺傷活性的NKTm細胞，T細胞亞群檢測，然后用NKTm細胞同順鉑(DDP)作用，MTT法檢測繪制時間

4、生存率曲線；培養(yǎng)乳腺癌細胞系MDA-MB-231，分別運用MTT及流式細胞儀兩種檢測方法，觀察在NKTm細胞及順鉑在不同時序下對乳腺癌細胞系的抑制情況。
　　 [結(jié)果]從不同個體NKTm細胞的體外對乳腺癌細胞MDA-MB-231的抑制實驗可以看到，NKTm細胞具有一定的體外抑制作用，但不同個體的NKTm細胞的抑制率不同。對NKTm、DDP相互作用來說，在DDP濃度一定情況下，隨著DDP作用時間延長NKTm細胞的存活率下降明顯，兩

5、者聯(lián)合使用可觀察到對乳腺癌細胞系的抑制率增強；NKTm細胞對腫瘤抑制呈現(xiàn)效靶比依賴性(p<0.05)；相比較對應(yīng)時序下的抑制率，可見先NKTm后聯(lián)合DDP各組對腫瘤抑制率都大于先DDP后聯(lián)合NKTm各組。
　　 [結(jié)論]
　　 1、不同個體的NKTm細胞對乳腺癌細胞MDA-MB-231的抑制率不同。
　　 2、NKTm細胞對乳腺癌細胞系體外抑制率具有效靶比依賴性。
　　 3、NKTm在DDP作用下，隨著作