沙利度胺聯(lián)合順鉑在A549肺腺癌細(xì)胞株的研究.pdf

1、目的： 1、觀察沙利度胺(thalidomide)與化療藥物順鉑(DDP)聯(lián)合應(yīng)用對A549人肺腺癌細(xì)胞生長抑制及凋亡的影響； 2、觀察沙利度胺對肺腺癌A549細(xì)胞VEGF、BFGF蛋白表達(dá)的影響。 方法：將A549人肺腺癌細(xì)胞株于37℃、5％CO2條件下進(jìn)行培養(yǎng)。 1、待細(xì)胞呈對數(shù)生長，接種于96孔培養(yǎng)板，設(shè)空白對照組、thalidomide組、DDP組及thalidomide+DDP聯(lián)合組，經(jīng)不同濃度

2、藥物處理后，應(yīng)用MTT法檢測thalidomide與DDP聯(lián)用對細(xì)胞增殖的影響，并計算兩藥聯(lián)合效應(yīng)； 2、將細(xì)胞培養(yǎng)于5ml培養(yǎng)瓶，設(shè)空白對照組、thalidomide組、DDP組及thalidomide+DDP聯(lián)合組，經(jīng)不同濃度DDP(2mg/l、4mg/l)加或不加thalidomide培養(yǎng)48h后，用PI單染法流式細(xì)胞檢測細(xì)胞凋亡率； 3、采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測thalidomide處理后肺腺癌A549細(xì)胞VEG

3、F、BFGF蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果： 1、thalidomide與DDP聯(lián)合對A549細(xì)胞的生長抑制效應(yīng)：在一定濃度范圍內(nèi)，thalidomide和DDP均可抑制A549人肺腺癌細(xì)胞的生長，經(jīng)Pearson相關(guān)分析，其抑制作用呈量-效關(guān)系。DDP單用時，濃度為2.0mg/L可顯著抑制A549細(xì)胞的增殖；Thalidomide單用時，濃度為7.5mg/L可顯著抑制A549細(xì)胞的增殖。而thalidomide7.5mg/L與

4、DDP聯(lián)用時，DDP濃度為0.5mg/L時即可抑制A549細(xì)胞的生長，聯(lián)合組抑瘤作用強(qiáng)于單獨(dú)應(yīng)用DDP組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義。按照兩藥合用效果公式推算，當(dāng)thalidomide7.5mg/L分別聯(lián)用DDP濃度為0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、4 mg/L、8mg/L時，Q值均在0.85～1.14之間，兩者之間呈相加關(guān)系。且在一定濃度范圍內(nèi)，thalidomide與DDP合用，隨時間延長其對細(xì)胞的生長抑制率增大。 2、th

5、alidomide與DDP聯(lián)合對人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡的作用：對照組細(xì)胞凋亡率3.34％±0.1％；DDP(2mg/l)組4.92％±0.08％；DDP(4mg/l)組6.41％±0.47％；thalidomide(7.5mg/l)組15.95％±0.18％；thalidomide(7.5mg/l)+DDP(2mg/l)組17.53％±0.57％；thalidomide(7.5mg/l)+DDP(4mg/l)組72.77％±2.76％

6、，隨著DDP濃度的增加，A549細(xì)胞的凋亡率增加，thalidomide聯(lián)合DDP處理組細(xì)胞凋亡率明顯高于單藥組。 3、thalidomide7.5 mg/l作用于人肺腺癌A549細(xì)胞后，處理組的VEGF蛋白表達(dá)與未加藥組比較差異顯著。處理組的BFGF蛋白表達(dá)與未加藥組比較差異顯著。 結(jié)論： 1、沙利度胺與化療藥物DDP聯(lián)合，可增強(qiáng)對A549人肺腺癌細(xì)胞的生長抑制效應(yīng)，當(dāng)DDP濃度≥0.5mg/L時，兩者具有相加