影響綿羊胚胎移植效果相關基因的研究.pdf

1、國內外對綿羊胚胎移植技術的研究已有幾十年的歷史，但由于受各種因素的影響，效果并不十分穩(wěn)定，分子標記輔助選擇為解決這一問題提供了新的思路。BMPR-IB基因的突變(A746G)與BooroolaMerino羊高繁殖力性狀密切相關；FSHR基因在哺乳動物生殖過程中具有重要的作用，F(xiàn)SH和FSHR間的相互作用對于正常精子和卵子的發(fā)生是至關重要的。 本研究以BMPR-IB基因和FSHR基因為候選基因，以小尾寒羊及其雜交羊、東北半細毛羊、

2、澳洲美利奴羊、德國肉用美利奴羊、薩?？搜?、特克塞爾羊、夏洛萊羊為實驗對象，采用PCR-RFLP和PCR-SSCP兩種標記方法進行基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測和基因型分析，針對實驗群體的特點建立合適的統(tǒng)計分析模型，進行BMPR-IB基因和FSHR基因SNPs與胚胎移植各項指標間的相關分析。研究結果如下： 1.在7個綿羊品種中，對BMPR-IB基因A746G突變進行檢測，群體遺傳學分析表明基因型頻率在品種間存在極顯著差異(P＜0

3、.01)。 2.攜帶B等位基因的群體較非攜帶B等位基因的群體自然狀態(tài)下排出更多的卵子，差異極顯著(P＜0.01)，且排卵后黃體直徑較小，差異顯著(P＜0.05)。 3.BMPR-IB基因不同基因型綿羊群體移入冷凍胚胎后表現(xiàn)出不同的移植后妊娠率，BB型群體顯著高于其它基因型群體，達到了66.67％，冷凍胚胎移植妊娠率接近了鮮胚移植的妊娠率。因此推斷，BMPR-IB基因突變很有可能從增加卵巢排卵數(shù)和提高胚胎著床及妊娠建立效率

4、兩個方面同時影響綿羊高繁殖力性狀。由此可以通過PCR-RFLP方法進行基因型分析，選用合適的基因型群體作為胚胎移植受體，從而為提高綿羊胚胎移植妊娠率提供新的方向。 4.對綿羊FSHR基因第10外顯子全長進行PCR-SSCP檢測，但未發(fā)現(xiàn)與人類和牛相似的SNPs。 5.在FSHR基因5′調控區(qū)檢測到三個SNP位點存在。其中，引物FSHRP1擴增產物中檢測到C-528T突變，群體遺傳學分析表明基因型頻率在品種間存在顯著差異(