熱休克法制備高效樹突狀細胞腫瘤疫苗治療小鼠乳腺癌.pdf

1、目錄中文摘要1英文摘要4符號說明一7—1￡_一刖吾8材料與方法9結(jié)果14討論16結(jié)侖23附圖。24參考文獻28綜述32致謝”j一45原創(chuàng)性聲明462分別利用熱休克和凍融法處理小鼠EMT6乳腺癌細胞，研究所獲得的乳腺癌細胞裂解物當中熱休克蛋白70(HotShockProtein70，HSP70)的表達情況。3將獲得全細胞抗原與培養(yǎng)的樹突狀細胞混合培養(yǎng)，制備小鼠樹突狀細胞乳腺癌腫瘤疫苗。分別利用以上制備的不同的小鼠乳腺癌樹突狀細胞腫瘤疫苗治

2、療小鼠移植瘤，對比熱休克法和凍融法制備的小鼠乳腺癌樹突狀細胞腫瘤疫苗對荷瘤小鼠的療效。42l天時處死小鼠，稱量小鼠腫瘤體積及質(zhì)量，并取血比較不同治療組小鼠血清中細胞因子(cytokine)干擾素吖(Interferon1，INF7)、白細胞介素一2(Interleukin2，IL2)和白細胞介素一12(P70)(Interleukin一12，IL一12(P70))的水平。方法I1定期通過光學顯微鏡觀察培養(yǎng)的樹突狀細胞的形念，利用流式細胞

3、儀對樹突狀細胞的表型進行分析。2用免疫組織化學法(immunohistochemicalmethod)檢測不同方法制備的小鼠乳腺癌腫瘤細胞中HSP70的表達量的不同。3建立小鼠乳腺癌動物模型并分組，應(yīng)用不同的樹突狀細胞腫瘤疫苗進行治療。4至21天，，處死小鼠，稱量小鼠腫瘤體積和質(zhì)量，并取血利用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)法測定各組小鼠血清中細胞因子INF丫、IL一2、IL1

4、2(P70)的水平。結(jié)果L通過對骨髓源性樹突狀細胞形態(tài)的觀察及流式細胞儀(flowcytometry)對細胞表面表型分析，利用GM—CSF、IL4和TNF—a聯(lián)合培養(yǎng)的小鼠骨髓來源的樹突狀細胞為典型的成熟樹突狀細胞。2經(jīng)免疫組織化學法檢測，熱休克法制備的小鼠EMT6乳腺癌細胞裂解物中HSP70的表達量遠遠大于凍融法制備的小鼠EMT6乳腺癌細胞裂解物中HSP70的表達量。3與凍融法疫苗治療組小鼠腫瘤相比較，熱休克法疫苗治療組小鼠的腫瘤質(zhì)量