熱休克凋亡膠質瘤細胞負載樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備及其臨床試驗性運用.pdf

1、腦惡性膠質瘤是中樞神經系統(tǒng)（central nervous system CNS）原發(fā)性惡性腫瘤中最常見的腫瘤。其手術難以全切，術后易復發(fā)，對化療和放療僅為中度敏感，因此，目前現(xiàn)有的國際公認的規(guī)范化序貫治療方案“手術+放療+化療”難以根治腦惡性膠質瘤。
　　 生物免疫治療主要是利用生物工程的方法，調動患者自身免疫機制，利用抗體、細胞因子治療，過繼免疫治療及基因治療等手段來提高療效，抑制腫瘤復發(fā)，提高患者的生活質量，是繼手術、放化

2、療后的第四種治療模式。與前三種傳統(tǒng)治療技術相比，生物免疫治療有安全、有效及低毒副作用的優(yōu)勢。
　　 本課題采用熱休克技術，將人腦膠質瘤細胞致敏人外周血來源的DCs，制備腫瘤細胞疫苗，觀察其體外的生物學作用；在此基礎上將術中病理證實為膠質母細胞瘤標本，經熱休克誘導腫瘤細胞凋亡，負載患者自體外周血來源DCs，制備腫瘤細胞疫苗，輸注淋巴結，觀察其臨床有效性和安全性。
　　 第一部分熱休克誘導凋亡的腦膠質瘤細胞負載樹突狀細胞及其

3、激發(fā)T細胞的體外試驗。
　　 目的：制備熱休克誘導凋亡的腦膠質瘤細胞負載樹突狀細胞（dendrie cell DC），探討其激發(fā)T細胞的作用。
　　 方法：誘導正常人外周血來源未成熟DC，負載熱休克誘導凋亡的腦膠質瘤細胞的DC，通過雙熒光標記法流式檢測DC表型、MTT。法測定CTL活性。
　　 結果：負載熱休克腦膠質瘤細胞的DC具有良好的激活CTL作用及對膠質瘤的殺傷效應也顯著高于負載凍融裂解腦膠質瘤細胞制備的D

4、C，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而且殺傷活性隨著效靶比而增加。
　　 結論：負載熱休克腦膠質瘤細胞的樹突狀細胞有良好的激發(fā)CTL殺傷腫瘤的作用，是一種具有潛在臨床運用價值的腫瘤疫苗。
　　 第二部分負載熱休克腦膠質瘤細胞的自體樹突狀細胞疫苗的臨床試驗。
　　 目的：通過采集患者膠質母細胞瘤手術標本，經過熱休克誘導腫瘤細胞凋亡，負載患者自體外周血來源DCs，制備人腦膠質瘤DC疫苗及其臨床療效的評價。
　

5、　 方法：通過采集患者膠質母細胞手術標本，采用熱休克誘導腫瘤細胞凋亡，制備自體人腦膠質瘤DC疫苗。遵循臨床試驗管理規(guī)范，經按院倫理委員會批準的臨床試用方案，設立DC治療組和對照組，對照組采用傳統(tǒng)的手術及術后放化療方法，DC治療組在傳統(tǒng)治療基礎上，通過自體來源的DC疫苗，聯(lián)合術后放化療，比較觀察兩組患者的免疫功能、腫瘤的局控率、患者的生存時間、Karnofsky，評分和并發(fā)癥情況，探討DC疫苗治療腦膠質瘤母細胞的安全性及有效性。