熱休克凋亡膠質(zhì)瘤細胞負載樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備及其臨床試驗性運用.pdf

1、腦惡性膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system CNS）原發(fā)性惡性腫瘤中最常見的腫瘤。其手術(shù)難以全切，術(shù)后易復(fù)發(fā)，對化療和放療僅為中度敏感，因此，目前現(xiàn)有的國際公認的規(guī)范化序貫治療方案“手術(shù)+放療+化療”難以根治腦惡性膠質(zhì)瘤。
　　 生物免疫治療主要是利用生物工程的方法，調(diào)動患者自身免疫機制，利用抗體、細胞因子治療，過繼免疫治療及基因治療等手段來提高療效，抑制腫瘤復(fù)發(fā)，提高患者的生活質(zhì)量，是繼手術(shù)、放化

2、療后的第四種治療模式。與前三種傳統(tǒng)治療技術(shù)相比，生物免疫治療有安全、有效及低毒副作用的優(yōu)勢。
　　 本課題采用熱休克技術(shù)，將人腦膠質(zhì)瘤細胞致敏人外周血來源的DCs，制備腫瘤細胞疫苗，觀察其體外的生物學作用；在此基礎(chǔ)上將術(shù)中病理證實為膠質(zhì)母細胞瘤標本，經(jīng)熱休克誘導腫瘤細胞凋亡，負載患者自體外周血來源DCs，制備腫瘤細胞疫苗，輸注淋巴結(jié)，觀察其臨床有效性和安全性。
　　 第一部分熱休克誘導凋亡的腦膠質(zhì)瘤細胞負載樹突狀細胞及其

3、激發(fā)T細胞的體外試驗。
　　 目的：制備熱休克誘導凋亡的腦膠質(zhì)瘤細胞負載樹突狀細胞（dendrie cell DC），探討其激發(fā)T細胞的作用。
　　 方法：誘導正常人外周血來源未成熟DC，負載熱休克誘導凋亡的腦膠質(zhì)瘤細胞的DC，通過雙熒光標記法流式檢測DC表型、MTT。法測定CTL活性。
　　 結(jié)果：負載熱休克腦膠質(zhì)瘤細胞的DC具有良好的激活CTL作用及對膠質(zhì)瘤的殺傷效應(yīng)也顯著高于負載凍融裂解腦膠質(zhì)瘤細胞制備的D

4、C，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而且殺傷活性隨著效靶比而增加。
　　 結(jié)論：負載熱休克腦膠質(zhì)瘤細胞的樹突狀細胞有良好的激發(fā)CTL殺傷腫瘤的作用，是一種具有潛在臨床運用價值的腫瘤疫苗。
　　 第二部分負載熱休克腦膠質(zhì)瘤細胞的自體樹突狀細胞疫苗的臨床試驗。
　　 目的：通過采集患者膠質(zhì)母細胞瘤手術(shù)標本，經(jīng)過熱休克誘導腫瘤細胞凋亡，負載患者自體外周血來源DCs，制備人腦膠質(zhì)瘤DC疫苗及其臨床療效的評價。
　

5、　 方法：通過采集患者膠質(zhì)母細胞手術(shù)標本，采用熱休克誘導腫瘤細胞凋亡，制備自體人腦膠質(zhì)瘤DC疫苗。遵循臨床試驗管理規(guī)范，經(jīng)按院倫理委員會批準的臨床試用方案，設(shè)立DC治療組和對照組，對照組采用傳統(tǒng)的手術(shù)及術(shù)后放化療方法，DC治療組在傳統(tǒng)治療基礎(chǔ)上，通過自體來源的DC疫苗，聯(lián)合術(shù)后放化療，比較觀察兩組患者的免疫功能、腫瘤的局控率、患者的生存時間、Karnofsky，評分和并發(fā)癥情況，探討DC疫苗治療腦膠質(zhì)瘤母細胞的安全性及有效性。