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1、夏季熱應(yīng)激是影響奶牛產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)的重要因素,目前已證實(shí),氧化應(yīng)激在誘發(fā)奶牛乳腺細(xì)胞損傷方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。本文研發(fā)了腎茶莖和腎茶葉抗氧化物提取工藝,建立H2O2誘導(dǎo)的HC11細(xì)胞氧化應(yīng)激模型,研究不同抗氧化劑對(duì)HC11細(xì)胞氧化損傷的修復(fù)作用和機(jī)理,以及微生物源性抗氧化劑對(duì)熱應(yīng)激奶牛生產(chǎn)性能、抗氧化能力以及免疫功能的影響,研究結(jié)果為解決基于氧化-抗氧化平衡的奶牛熱應(yīng)激問題提供了理論依據(jù)。
第一部分利用響應(yīng)面法研究超聲溫度、乙醇
2、濃度、超聲時(shí)間和料液比四個(gè)因素對(duì)提取物總抗氧化能力的影響。結(jié)果表明,腎茶莖和腎茶葉優(yōu)化提取工藝常數(shù)分別為:超聲溫度70℃,乙醇濃度56.25%,時(shí)間25.59 min,料液比1:40、超聲溫度69.93℃,乙醇濃度55.85%,時(shí)間24.36 min,料液比1:40。腎茶莖提取物和腎茶葉提取物理論總抗氧化能力分別等量于211.41和919.25μmol Trolox,而實(shí)際腎茶莖和葉提取物的總抗氧化能力分別等量于209.96和915.8
3、6μmol Trolox。
第二部分建立了 H2O2誘導(dǎo)的HC11細(xì)胞氧化應(yīng)激模型,并研究不同抗氧化劑對(duì)HC11細(xì)胞氧化損傷的影響。結(jié)果表明,H2O2誘導(dǎo)的HC11細(xì)胞氧化應(yīng)激模型最適的作用濃度和時(shí)間分別是400μmol/L和3h。微生物源性抗氧化劑、腎茶葉和莖提取物最適宜添加濃度分別為100、10、100μg/L時(shí),顯著提高H2O2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激HC11細(xì)胞SOD和GSH-Px的活性(P<0.05);降低HC11細(xì)胞MDA和
4、蛋白質(zhì)羰基化含量(P<0.05),減少HC11細(xì)胞DNA損傷;降低了Caspase蛋白酶的活性;提高HC11細(xì)胞總蛋白和β-酪蛋白含量(P<0.05)。
第三部分研究不同季節(jié)奶牛的抗氧化能力以及微生物源性抗氧化劑對(duì)奶??寡趸蜕a(chǎn)性能的影響。
試驗(yàn)一選擇6頭胎次、泌乳周期、泌乳量相近的泌乳前期奶牛,比較不同季節(jié)(夏季和冬季)奶牛的抗氧化性能。結(jié)果顯示,夏季奶牛的GSH-Px、T-AOC、SOD活性顯著高于冬季(P<
5、0.05),而MDA、Cortisol含量顯著低于冬季組(P<0.05)。說明奶牛在高溫季節(jié)抗氧化能力降低,奶牛發(fā)生了氧化應(yīng)激。
試驗(yàn)二將胎次、泌乳周期、泌乳量相近的36頭荷斯坦奶牛隨機(jī)分成2組,試驗(yàn)期60天。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中每天每頭添加50g微生物源性抗氧化劑。結(jié)果表明,試驗(yàn)組中奶牛的奶產(chǎn)量在飼養(yǎng)第50天后顯著提高(P<0.05),同一階段,奶液的體細(xì)胞數(shù)呈現(xiàn)顯著下降趨勢(shì)(P<0.05);血清中SOD和
6、IHR、IgA、IgG、GSH-Px和IL-2含量顯著提高(P<0.05);血清和乳清中的MDA和8-iso-PGF2α含量顯著降低(P<0.05)。說明夏季在奶牛飼糧中添加微生物源性抗氧化劑可以增強(qiáng)奶牛血清、乳清的抗氧化和機(jī)體的免疫能力,并提高了奶產(chǎn)量和奶品質(zhì)。
研究證明,氧化應(yīng)激造成HC11細(xì)胞脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)和DNA損傷,誘發(fā)乳腺細(xì)胞凋亡和乳腺細(xì)胞功能障礙,降低了乳腺細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的能力,而抗氧化劑對(duì)這一過程有調(diào)節(jié)作用
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