STAT1反義寡核苷酸霧化吸入對肺纖維化大鼠肺組織HSP47表達的影響.pdf

1、目的:觀察信號轉導子和轉錄活化子1(signal transducer andactivator of transcription1,STAT1)反義寡核苷酸(ASON)霧化吸入對博來霉素致肺纖維化大鼠肺組織中熱休克蛋白47(heat shockprotein47,HSP47)表達的影響,探討其抗纖維化的作用機制。方法:將45只Wistar大鼠按隨機數(shù)字表法分為對照組、模型組和干預組,每組15只。對照組氣管內灌注生理鹽水,模型組和干預組

2、氣管內灌注博來霉素,于灌注后第0、2、4、6天對照組和模型組霧化吸入生理鹽水,干預組霧化吸入STAT1反義寡核苷酸/DOTAP復合物。分別于霧化后第7天、第14天和第28天每組各處死5只大鼠。肺組織HE染色和Masson染色觀察肺泡炎和肺纖維化改變,免疫組織化學SP法測定肺組織中HSP47的表達；逆轉錄.聚合酶鏈反應(ReverseTranscription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)測定肺組織中

3、Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA表達；肺組織勻漿測定羥脯氨酸含量。樣本均數(shù)間比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗。結果:(1)病理切片觀察:對照組各時間點的肺組織結構正常。模型組第7天時肺泡炎最重,肺泡腔內可見大量炎性細胞浸潤；第14天時肺泡腔內炎癥細胞減少,膠原明顯增多,肺泡結構破壞,肺泡隔增寬；第28天肺纖維化程度加重,部分肺泡腔消失,形成嚴重纖維化。干預組各時間點的炎性細胞浸潤程度較輕,膠原纖維增生較少,第28天時肺泡結構尚存。干預組各時間

4、點肺泡炎和纖維化程度評分(分別為2.6±0.9、2.2±0.5、1.8±0.8及1.6±0.6、2.2±0.6、2.6±0.6)較模型組(分別為3.6±0.6、3.2±0.5、2.4±0.6及2.2±0.5、3.2±0.5、4.4±0.6)明顯降低(P<0.05),干預組和模型組較對照組(各時間點分別為1.4±0.6、1.0±0.0、1.0±0.0及1.0±0.0、1.0±0.0、1.0±0.0)明顯增高(P<0.05)。(2)對照組、

5、模型組、干預組肺組織HSP47表達積分吸光度值第7天分別為94.58±4.84、279.22±6.14、206.45±5.21,第14天分別為93.98±5.66、338.78±11.59、278.02±9.22,第28天分別為92.92±4.15、388.24±9.32、323.73±13.51。與對照組比較,模型組、干預組肺組織HSP47表達水平均顯著升高(P<0.01)。與模型組比較,干預組各時間點HSP47表達水平均降低(P<0

6、.05)。(3)干預組各時間點Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA相對表達量(分別為1.36±0.10、1.19±0.28、1.22±0.24及1.20±0.09、0.62±0.09、0.76±0.12)較模型組(分別為3.29±0.28、2.04±0.25、1.91±0.30及1.63±0.15、1.58±0.13、1.12±0.09)明顯降低(P<0.05),干預組和模型組較對照組(各時間點分別為0.68±0.15、0.81±0.16、0.79±0

7、.05及0.35±0.04、0.40±0.17、0.31±0.04)明顯增高(P<0.05)。(4)干預組各時間點羥脯氨酸含量[分別為(3.02±0.13)mg/g、(3.24±0.31)mg/g、(3.60±0.16)mg矧較模型組[分別為(3.76±0.10)mg/g、(3.92±0.30)mg/g、(4.62±0.28)mg/g]降低(P<0.05),干預組和模型組較對照組[分別為(1.99±0.10)mg/g、(1.99±0.1