辛伐他汀抑制肺癌細胞增殖的氧化應激調(diào)控機制.pdf

1、他汀類藥物(statins)通過競爭性結(jié)合生物膽固醇合成限速酶一HMG-CoA還原酶，從而阻斷甲羥戊酸形成，最終達到有效降低膽固醇合成的效果。與其他降脂藥物相比，他汀類藥物降低血清膽固醇和低密度脂蛋白效果顯著、副作用小、安全性高，是目前臨床上治療高膽固醇血癥的一線藥物。臨床應用中發(fā)現(xiàn)他汀類藥物除降血脂作用外，同時還具有逆轉(zhuǎn)內(nèi)皮功能異常、調(diào)節(jié)免疫功能、減少室性心律失常及血栓形成等多效性效果。近年來研究進一步發(fā)現(xiàn)，他汀類藥物對腫瘤細胞具有抑

2、制增殖、誘導分化或凋亡、抑制血管發(fā)生、降低侵襲轉(zhuǎn)移能力等作用。大量體內(nèi)外實驗均證實，他汀類藥物對前列腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、膀胱癌及乳腺癌等多種癌細胞均有顯著抑制作用，且對正常細胞影響不大，是一種較有潛力的抗腫瘤藥物，其抗腫瘤作用及機制已成為近年來研究的熱點之一。
　　 目前研究發(fā)現(xiàn)，在癌變與抑癌過程中活性氧與自由基發(fā)揮著重要作用。事實上，癌細胞和癌組織主要在氧濃度低的機體內(nèi)環(huán)境下生存，而且比正常細胞的抗氧化防御系統(tǒng)脆弱?？拱﹦?/p>

3、多可產(chǎn)生活性氧和自由基并大量聚集于癌組織，從而發(fā)揮抗癌作用。當癌細胞處于氧化應激狀態(tài)時，細胞內(nèi)ROS量升高并激活相應的抗ROS防御體系，例如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)及抗氧化物質(zhì)(如維生素C、維生素E)等。超氧化物歧化酶(SOD)根據(jù)其所含金屬輔酶因子的不同可分為3類：銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD，SOD1)、錳型超氧化物歧化酶(MnSOD，SOD2)和含鐵超氧化物歧化酶(

4、FeSOD，SOD3)。其中錳型超氧化物歧化酶是線粒體內(nèi)主要的酶性自由基清除劑，對維持胞內(nèi)氧化還原平衡至關(guān)重要，且與腫瘤發(fā)生相關(guān)。
　　 為了明確他汀類藥物在肺癌治療中的應用可行性及其潛在的抑癌機制，本文以肺癌細胞A549為研究材料，探討辛伐他汀通過氧化應激及抑癌基因sod2的上調(diào)抑制A549的增殖。本文首先進行了辛伐他汀對A549生長抑制的量效測定和時效測定，然后選擇辛伐他汀50μmol/L，60μmol/L兩個濃度分析藥物作

5、用前后肺癌細胞A549中ROS、MDA、總SOD活性、SOD2活性水平的變化。為了進一步論證辛伐他汀對A549抑制作用與氧化應激之間的相關(guān)性，本文還分析了維生素C(Vc)對辛伐他汀細胞毒性的緩解作用。最后選用半定量RT-PCR的方法分析了藥物處理后A549細胞中sod2的表達變化。
　　 本文首先采用MTT法分析了辛伐他汀對A549增值的抑制作用。實驗結(jié)果顯示辛伐他汀作用肺癌細胞48h后，可產(chǎn)生顯著的抗細胞增殖作用，且呈明顯的劑

6、量和時間依賴性，并初步獲得辛伐他汀對A549的IC50約為50μmol/L。然后選用50μmol/L，60μmol/L的辛伐他汀作用A549，48h后進行檢測分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)MDA水平、SOD和SOD2活性均存在顯著上調(diào)，而VC的加入則可有效緩解辛伐他汀所引起的這種改變。說明辛伐他汀可破壞胞內(nèi)氧化還原平衡，促使細胞內(nèi)氧化應激增強，從而實現(xiàn)抑制細胞增殖的效果。錳型超氧化物歧化酶由基因sod2所編碼，在最新的研究中報道sod2是一種潛在

7、的新型抑癌基因.。辛伐他汀可以上調(diào)SOD2的活性，因此我們進一步分析了辛伐他汀對sod2 mRNA水平的調(diào)節(jié)作用。RT-PCR半定量分析顯示，50μmol/L和60μmol/L辛伐他汀可以使sod2基因的mRNA水平分別上調(diào)18.2％和35％說明辛伐他汀對A549的增值抑制可能是通過上調(diào)抑癌基因sod2來發(fā)揮作用的。
　　 上述實驗結(jié)果說明辛伐他汀可有效抑制肺癌細胞A549的增殖，其機制可能涉及到氧化應激以及對抑癌基因sod2的