RO40-8757對人胰腺癌細胞株JF-305抗增殖作用及其機制研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文RO408757對人胰腺癌細胞株JF305抗增殖作用及其機制研究姓名：蘇洋申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：郭克建20000501析，以探討R040—8757用于胰腺癌治療的潛力，為其臨床應用提供理論依據(jù)，為尋找一種新的胰腺癌治療藥物，改善胰腺癌的預后奠定基礎。材料與方法1選用中國醫(yī)科大學腫瘤研究所提供的胰腺癌細胞株JF一305，在100％濕度，5％CO。，37℃條件下培養(yǎng)于含lo％小牛血清的RPMI一16

2、40培養(yǎng)液中，單層傳代培養(yǎng)。所用藥物R040—8757用二甲基亞砜(DMSO)配成濃度為10也mol／L的溶液，使用時根據(jù)需要用培養(yǎng)液稀釋。2采用四甲基氮唑藍(MTT)實驗測定用藥前后細胞的增殖狀態(tài)。收集濃度為5104／ml的對數(shù)生長期細胞，以5103／孔的濃度接種于96孔培養(yǎng)板。設計4個用藥組和一個對照組，用藥組每孔再加入100弘1適當濃度的R040—8757，使不同用藥組R040—8757的濃度分別為10一，10一，10～，104m

3、ol／L；對照組每孔再加入10咄l培養(yǎng)液。設4復孔及本底孔。將96孔板在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24，48，72小時后，各孔分別加入MTT，培養(yǎng)4小時后以DMSO溶解，用酶標儀測吸光度值，計算生長抑制率值。3應用流式細胞術檢測細胞周期變化。JF一305細胞用lo—stool／LR040—8757處理72小時，消化收集106個細胞，固定后于碘化丙啶一步染色液中染色，在流式細胞儀上分析細胞周期的變化?！?WesternBlotting法檢測p27蛋白表