趨化因子Fractalkine調(diào)控IL-6-AKT-Stat3信號(hào)通路對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株增殖侵襲影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　初步探討趨化因子Fractalkine通過(guò)調(diào)控IL-6/AKT/Stat3信號(hào)通路對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株增殖侵襲影響及機(jī)制。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)設(shè)置為對(duì)照組、FKN-siRNA組及FKN-siRNA陰性組；以腺病毒為載體構(gòu)建合成FKN-siRNA并對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1和SW-1990進(jìn)行轉(zhuǎn)染；應(yīng)用CCK-8實(shí)驗(yàn)和Transwell小室侵襲試驗(yàn)分別檢測(cè)細(xì)胞增殖活性及侵襲力，采用Western blot和R

2、T-PCR技術(shù)檢測(cè)人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1和SW-1990轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后FKN、IL-6、AKT和Stat3蛋白及mRNA的表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用單因素方差分析。
　　結(jié)果:
　?。?）趨化因子FKN在人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1及SW-1990中均有表達(dá)，并且FKN-siRNA成功對(duì)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1及SW-1990轉(zhuǎn)染。
　　（2）通過(guò)CCK-8法測(cè)定細(xì)胞增殖活性：轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后在12h和2

3、4h時(shí)，PANC-1及SW-1990各組細(xì)胞吸光度值（OD）無(wú)明顯變化，在48h和72h時(shí)，F(xiàn)KN-siRNA組吸光度值明顯高于對(duì)照組和FKN-siRNA陰性組(P<0.05)。
　?。?）在細(xì)胞侵襲試驗(yàn)中，人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1及SW-1990轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后，F(xiàn)KN-siRNA組細(xì)胞侵襲力明顯強(qiáng)于對(duì)照組和FKN-siRNA陰性組(P<0.05)。
　?。?）Western blot和RT-PCR結(jié)果顯示：對(duì)人

4、胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1及SW-1990轉(zhuǎn)染FKN-siRNA后，與對(duì)照組和FKN-siRNA陰性組相比較，F(xiàn)KN-siRNA組FKN蛋白與mRNA表達(dá)明顯減少（P<0.05）,與此同時(shí)，IL-6、AKT及Stat3的蛋白與mRNA表達(dá)量在FKN-siRNA組中明顯增多（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.應(yīng)用siRNA干擾沉默趨化因子FKN的功能后，人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1和SW-1990的增殖活性和侵襲力增強(qiáng)，表明趨