Oxythiamine對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A-549增殖及凋亡的影響.pdf

1、目的:研究Oxythiamine對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A-549體外生長(zhǎng)和凋亡的影響，并初步探討可能的作用機(jī)制。
　　方法:
　　1利用倒置顯微鏡觀察人肺腺癌A-549細(xì)胞株經(jīng)Oxythiamine培養(yǎng)后細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變;
　　2分別用不同濃度Oxythiamine(0、0.2、2、20、200μmol/l)干預(yù)人肺腺癌A-549細(xì)胞株，細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)法(CCK8)檢測(cè)OD值，計(jì)算對(duì)照組和各實(shí)驗(yàn)組A-549細(xì)胞株的增值活

2、性;
　　3判斷細(xì)胞的死亡形式:用AnnexinⅤ/PI雙染法進(jìn)行流式檢測(cè)，判斷Oxythiamine誘導(dǎo)A-549細(xì)胞的死亡是否為凋亡。
　　結(jié)果:
　　1經(jīng)Oxythiamine培養(yǎng)24h后人肺腺癌A-549細(xì)胞變圓，貼壁能力降低，細(xì)胞之間連接變得不緊密，壞死細(xì)胞數(shù)明顯增多;
　　2 CCK-8法檢測(cè)結(jié)果顯示，Oxythiamine在體外能顯著抑制人肺腺癌A-549細(xì)胞的增殖，并且呈濃度、時(shí)間依賴關(guān)系，在Ox

3、ythiamine濃度為200μmol/l干預(yù)48h后有最大抑制效應(yīng)(P＜0.001);
　　3 AnnexinⅤ-FITC/PI雙熒光染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示，如圖2-2、2-4、2-6所示，對(duì)照組、Thiamine組細(xì)胞凋亡率處于較低水平，隨著Oxythiamine處理劑量的增加或干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞凋亡率逐漸升高，呈現(xiàn)出一定的劑量和時(shí)間依賴性關(guān)系，Oxythiamine干預(yù)A-549細(xì)胞48h后，與對(duì)照組相比，2、20、200

4、μmol/l實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率（早期凋亡+晚期凋亡）顯著增加，凋亡率分別為（22.977±1.333）％、(27.320±3.610)％、(31.447±2.566)％(P＜0.01)。表明Oxythiamine可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制人肺腺癌A-549細(xì)胞的增殖。
　　結(jié)論:
　　外源性O(shè)xythiamine對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A-549有抗增殖活性，并且這種效應(yīng)呈時(shí)間-濃度依賴關(guān)系;對(duì)人肺癌細(xì)胞株A-549添加外源性O(shè)xythi