二十碳五烯酸聯(lián)合依托泊苷對(duì)肺腺癌A-549細(xì)胞株的抑制作用.pdf

1、目的：探討二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid，EPA）及聯(lián)合依托泊苷對(duì)人肺腺癌A-549細(xì)胞株的抑制作用。
　　方法：分組：細(xì)胞（對(duì)照組、EPA40μg/ml、依托泊苷10μg/ml組、EPA40μg/ml+依托泊苷10μg/ml組、依托泊苷20μg/ml組、EPA40μg/ml+依托泊苷20μg/ml組），動(dòng)物（對(duì)照組、EPA組、依托泊苷組、EPA+依托泊苷組）。應(yīng)用MTT法、形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞術(shù)、免疫細(xì)

2、胞化學(xué)染色和檢測(cè)活性氧、細(xì)胞端粒酶、測(cè)量腫瘤直徑、腹水量及腹水中細(xì)胞數(shù)的變化來觀察聯(lián)合依托泊苷干預(yù)后的變化。
　　結(jié)果：1、MTT法：48h抑制率對(duì)照組/EPA40μg/ml組(2.06±0.56vs10.29±1.74，P=0.000）、依托泊苷10μg/ml組/EPA40μg/ml+依托泊苷10μg/ml組（33.41±3.44vs44.50±3.71，P=0.000）、依托泊苷20μg/ml組/EPA40+依托泊苷10μg/

3、ml組（44.64±4.77vs44.50±3.71，P=0.9288）、依托泊苷20μg/ml組/EPA40μg/ml+依托泊苷20μg/ml組（44.64±4.77v50.72±4.61，P=0.000）。2、形態(tài)學(xué)觀察：藥物干預(yù)后細(xì)胞凋亡增加，聯(lián)合組凋亡更加明顯；3、ROS：實(shí)驗(yàn)組光密度值增加（與對(duì)照組比較P<0.05），聯(lián)合組增加更加明顯。4、流式細(xì)胞術(shù)：G0/GI期細(xì)胞減少，S期和G2/M期細(xì)胞增多,提示肺腺癌A-549細(xì)胞株

4、被阻滯于S期及G2/M期。5、免疫細(xì)胞化學(xué)染色：藥物干預(yù)組細(xì)胞Bcl-2、Ki-67、Livin、Survivin和NF-κB表達(dá)降低，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas和Bax的表達(dá)增加，對(duì)照組/EPA40μg/ml組、依托泊苷10μg/ml組/EPA40μg/ml+依托泊苷10μg/ml組、依托泊苷20μg/ml組/EPA40μg/ml+依托泊苷20μg/ml組相比較均有顯著差異（P<0.05）。6、

5、端粒酶：實(shí)驗(yàn)組端粒酶表達(dá)下降，EPA40μg/ml組/對(duì)照組（86.00±5.48vs94.00±5.48,P=0.0497），EPA40μg/ml+依托泊苷10μg/ml組/依托泊苷10μg/ml組（50.00±7.07vs64.00±11.40,P=0.0479）。7、模型小鼠：實(shí)驗(yàn)組模型小鼠腫瘤直徑、腹水量及腹水中腫瘤細(xì)胞數(shù)均減少，照組/EPA組、依托泊苷組/EPA+依托泊苷組比較均有顯著差異（P<0.05）。
　　結(jié)論：1