川陳皮素對非小細胞肺癌A549細胞株的抑制作用及作用機理的研究.pdf

1、四川大學碩士學位論文川陳皮素對非小細胞肺癌A549細胞株的抑制作用及作用機理的研究姓名：管曉琳申請學位級別：碩士專業(yè)：藥理學指導教師：周黎明20060510●●●四川大學碩(博)士學位論文川陳皮素對非小細胞肺癌A549細胞株的抑制作用及作用機理的研究研究生管曉琳藥理學專業(yè)指導老師周黎明副教授中文摘要目的：為探討川陳皮素對癌細胞的抑制作用及作用機理，為川陳皮素最終能被開發(fā)成抗癌藥物奠定一定的實驗基礎(chǔ)，擬在本課題中，通過體外實驗觀察不同劑量

2、的川陳皮素對肺癌A549細胞增殖及生物學性狀的影響，并探討產(chǎn)生這種影響的原因。方法：為研究川陳皮素對A549的增殖抑制作用，用MTr法分析2、4、8、16、32、64、128pg／ml的川陳皮素對A549細胞的增殖抑制情況，并計算半數(shù)抑制濃度IC50：以25pg／m!、50Itg／ml／Il陳皮素，阿霉素01pg／ml為陽性對照作用于A549細胞繪N5天生長曲線；以10pg／ml、20pg／ml、40pg／m1)ll陳皮素，阿霉素01p

3、g／ml為陽性對照作用于A549細胞，觀察細胞的集落形成情況，并計算集落形成抑制率。為探討川陳皮素對A549的抑制作用機理是否為誘導凋亡，以25pg／ml，5pg／ml，10pg／ml，20pg／m1)ll陳皮素作用48小時后，Giemsa染色觀察細胞形態(tài)變化，Hoeehst33258熒光染色觀察細胞核形態(tài)變化；電鏡觀察80rtg／mt)ll陳皮素作用48小時后細胞形態(tài)變化；以10pg／ml，20pg／ml，40rtg／m1)ll陳皮素

4、分別處理細胞48／J、時、72小時后，DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA的斷裂情況，檢測細胞凋亡；以10pg／ml，20pg／ml，40pg／mlN陳皮素分別處理細胞48小時，80pg／ml川陳皮素處理細胞24／J、時后，流式細胞計數(shù)檢測細胞周期的改變、凋亡率及凋亡相關(guān)蛋EtBax和Bel2的表達。結(jié)果：MTT法提示川陳皮素濃度為4pg／ml一128I_tg／ml時。對A549細胞在藥物處理24、48、72時后抑制率為80／085％，241