隱丹參酮對(duì)人非小細(xì)胞肺癌抑制作用的研究.pdf

1、目的:研究隱丹參酮對(duì)體外人非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞模型和體內(nèi)人非小細(xì)胞肺癌荷瘤小鼠成瘤模型的抑制作用。
　　方法:
　　1.培養(yǎng)人非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞，予以隱丹參酮干預(yù)，MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況，檢測(cè)細(xì)胞集落形成情況，F(xiàn)CM檢測(cè)細(xì)胞周期，Realtime-PCR檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞周期調(diào)控因子，以及利用Western Blot檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡調(diào)控因子。
　　2.構(gòu)建人非小細(xì)胞肺癌荷瘤小鼠模型，移植部位皮下

2、給予隱丹參酮，檢測(cè)小鼠生長(zhǎng)及成瘤情況，并對(duì)腫瘤瘤塊行免疫組化檢測(cè)凋亡相關(guān)因子原位表達(dá)情況。
　　結(jié)果:體外人非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞模型研究發(fā)現(xiàn)隱丹參酮能抑制腫瘤細(xì)胞增殖及細(xì)胞集落形成，阻滯腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)于細(xì)胞周期G2/M期，此期的細(xì)胞周期蛋白經(jīng)Western Blot方法檢測(cè)提示Cyclin B1、CDK1和CDC25C表達(dá)下調(diào)、P21CIP1/WAF1表達(dá)上升，而細(xì)胞凋亡調(diào)控因子Bcl-2下降、P53和Bax上調(diào)，促使細(xì)胞發(fā)生凋

3、亡。Realtime-PCR檢測(cè)顯示CCNB1(cyclin B1)、CDK1(CDC2)和CDC25C表達(dá)均下調(diào)（＜0.5倍），CDKN1A(p21CIP1/WAF1)表達(dá)上調(diào)（＞2倍）。體內(nèi)小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)隱丹參酮可減緩荷瘤小鼠體重下降，比對(duì)照組小鼠精神狀態(tài)好，其瘤體生長(zhǎng)速度減緩。病理學(xué)檢測(cè)提示腫瘤異種移植呈現(xiàn)相對(duì)于對(duì)照組的低密度浸潤(rùn)，同時(shí)存在有顯著無(wú)活力的腫瘤細(xì)胞。而TUNEL檢測(cè)提示隱丹參酮可促進(jìn)腫瘤瘤體內(nèi)的凋亡小體增多。免疫組