隱丹參酮、丹參酮Ⅱ-A的抗炎癥及抗癌癥作用機制.pdf

1、丹參(Salvia miltiorrhiza Bge)是我國傳統(tǒng)中藥中的重要一員。早在兩千年前人們就將丹參用于祛瘀止痛，活血通經，清心除煩等方面。丹參的主要成分有丹參酮Ⅰ、ⅡA、ⅡB（tanshinoneⅠ、ⅡA、ⅡB）異丹參酮Ⅰ、ⅡA（isotanshinoneⅠ、ⅡA）、隱丹參酮（cryptotanshinone）、異隱丹參酮（isocryptotanshin-one）、甲基丹參酮（methyItanshinone）、羥基丹參酮。丹

2、參及丹參酮類物質作為活血、保心、抗炎等藥物在臨床已經使用多年，但是對其抗炎癥、癌癥的作用靶點及機理還不清晰。我們在小鼠巨噬細胞系RAW264.7和人肝癌細胞系Hep G2中，通過使用半定量RT-PCR、Western Blot、ELISA、MTT 比色法等方法研究丹參抗炎癥、癌癥分子作用機理，發(fā)現(xiàn)其能夠通過抑制磷脂酶A2酶活及轉錄，抑制Bcl-2蛋白，從而實現(xiàn)其抗炎癥、癌癥目的。 首先，使用隱丹參酮刺激經LPS處理的巨噬細胞RA

3、W264.7細胞，通過半定量RT-PCR、Western Blot、HPLC等方法研究隱丹參酮對花生四烯酸代謝途徑中關鍵酶—PLA2、COX-2。我們發(fā)現(xiàn)隱丹參酮在轉錄水平和酶活水平上均能有效地抑制cPLA2；COX-2在轉錄和翻譯水平上卻都沒有受到隱丹參酮的抑制。 其次，在RAW264.7細胞中以同樣的方法檢測炎癥相關因子—IL-6和IL-10的變化。結果顯示，隱丹參酮在轉錄和翻譯水平上能有效地抑制IL-6，同時也能有效地提高

4、IL-10的含量。隱丹參酮對IL-6和IL-10的影響是專一性的，是在炎性的條件下的特異作用。 最后，在人肝癌細胞Hep G2細胞中研究了丹參酮Ⅱ-A的抗癌癥機理。實驗結果表明，丹參酮Ⅱ-A能通過抑制Bcl-2蛋白來激發(fā)Hep G2細胞的凋亡途徑來達到抑制Hep G2的效果，其抑制作用與丹參酮Ⅱ-A濃度成正比。隱丹參酮的半抑制濃度：IC50＝94.6μM；半定量RT-PCR顯示丹參酮Ⅱ-A能通過抑制凋亡相關基因——Bcl-2來實