丹參酮I抗血管生成作用和機制研究.pdf

1、目的：腫瘤生長和轉(zhuǎn)移與新生血管生成(angiogenesis)緊密相關(guān)。抑制血管生成已成為抗腫瘤治療的重要策略。腫瘤血管生成抑制劑（Tumor angiogenesis inhibitor TAI)是抗腫瘤新藥研發(fā)領(lǐng)域的一大熱點。傳統(tǒng)中藥丹參的活性成分丹參酮I具有抗腫瘤、抗耐藥、抗轉(zhuǎn)移作用。本研究的目的是研究丹參酮I是否具有新生血管抑制作用并揭示其特點、闡明其作用機制。
　　方法：首先，采用血管內(nèi)皮細胞的增殖、遷移、管腔形成模型闡

2、明丹參酮 I在體外對新生血管生成過程主要步驟的作用。其次，應(yīng)用大鼠動脈環(huán)出芽以及雞胚脲囊膜模型考察丹參酮I在半體內(nèi)以及體內(nèi)模型中對新生血管生成的整個過程的影響。最后，利用Westen blotting、Real-time qPCR、ELISA以及RNAi干擾等技術(shù)研究丹參酮 I在缺氧、常氧等不同條件下新生血管生成抑制作用的分子機制。
　　結(jié)果：丹參酮I能夠濃度依賴性地抑制HMEC-1內(nèi)皮細胞增殖，72 h的IC50約為7.75μM

3、；在對內(nèi)皮細胞無明顯細胞毒作用的濃度下，丹參酮I對內(nèi)皮細胞的遷移和管腔形成均具有很強的抑制作用，50μM時抑制率分別達到58％和94%并呈現(xiàn)明顯濃度依賴性。在濃度為1.25μM時明顯抑制大鼠動脈環(huán)模型中的微血管形成；在雞胚脲囊膜模型中0.1μM時即顯示明顯抑制血管生成作用。機制研究結(jié)果顯示，在常氧和缺氧條件下，丹參酮 I均濃度依賴性地下調(diào)內(nèi)皮細胞和腫瘤細胞中的p-Tyr705-Stat3；同時直接減少內(nèi)皮細胞和腫瘤細胞中由缺氧誘導(dǎo)的HI

4、F-1α蓄積。此外，丹參酮I還在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平同時降低腫瘤細胞中的VEGF水平，從而抑制其旁分泌刺激內(nèi)皮細胞形成新生血管的作用。采用siRNA干擾技術(shù)進一步闡明丹參酮 I對管腔和VEGF的抑制作用主要是通過Stat3和HIF-1α共同調(diào)節(jié)的。
　　結(jié)論：本研究闡明了丹參酮Ⅰ具有從多個環(huán)節(jié)抑制新生血管生成的作用；該作用與丹參酮I在缺氧和常氧條件下減少p-Tyr705-Stat3水平和缺氧誘導(dǎo)的HIF-1α蓄積緊密相關(guān)。丹參酮 I