mTORC2-AKT反饋激活拮抗隱丹參酮對HepG2細胞的抑制作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗主要研究隱丹參酮對絲/蘇氨酸蛋白激酶活性的影響及其在抑制肝癌細胞株中生長的作用。
  方法:Western印跡檢測隱丹參酮在HepG2細胞對絲/蘇氨酸蛋白激酶磷酸化的影響以及聯(lián)合哺乳動物雷帕霉素靶蛋白的抑制劑PP242后檢測其凋亡標志物c-Parp的表達、以及絲/蘇氨酸蛋白激酶的激活途徑。CCK-8法檢測隱丹參酮與絲/蘇氨酸蛋白激酶抑制劑MK2206或哺乳動物雷帕霉素靶蛋白的抑制劑PP242聯(lián)合用藥對HepG2的生長抑

2、制作用。
  結果:1.隱丹參酮增強HepG2細胞中絲/蘇氨酸蛋白激酶的磷酸化。2.抑制絲/蘇氨酸蛋白激酶的反饋激活增強隱丹參酮對HepG2細胞的生長抑制作用,結果發(fā)現(xiàn)MK2206明顯增強了隱丹參酮對HepG2細胞的生長抑制作用。3.隱丹參酮對絲/蘇氨酸蛋白激酶磷酸化的增強作用依賴于哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物2活性,結果發(fā)現(xiàn)PP242能夠抑制隱丹參酮對絲/蘇氨酸蛋白激酶磷酸化的增強作用,證明隱丹參酮對絲/蘇氨酸蛋白激酶磷酸化的增

3、強作用依賴于哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物2活性。4.抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物2活性增強隱丹參酮對HepG2細胞的生長抑制作用,結果發(fā)現(xiàn)聯(lián)合使用PP242明顯增強了隱丹參酮對HepG2細胞的生長抑制作用。5.抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物2活性增強隱丹參酮對HepG2細胞的凋亡誘導效應,由于絲/蘇氨酸蛋白激酶信號通路在腫瘤細胞存活中發(fā)揮重要作用,說明抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物2活性能夠增強隱丹參酮對HepG2細胞的凋亡誘導

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