芝麻素對人肺腺癌A-549細胞影響的研究.pdf

1、目的：探討原芝麻素對人肺腺癌A-549細胞株的抗增殖和誘導凋亡作用及其機制，為開發(fā)抗腫瘤中藥提供實驗和理論依據(jù)
　　方法：采用體外細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)人肺腺癌A-549細胞;應(yīng)用MTT法測定原芝麻素對人肺腺癌A-549細胞株的抗增殖及細胞毒性作用；應(yīng)用倒置顯微鏡、HE染色法來觀察腫瘤細胞的形態(tài)學變化；應(yīng)用流式細胞術(shù)(Flowcytometry，F(xiàn)CM)分析細胞周期分布和凋亡情況；AnnexinV/PI雙標法分析細胞凋亡率；測定細胞Bc

2、l-2及Bax表達水平；應(yīng)用免疫細胞化學技術(shù)檢測藥物作用前后凋亡蛋白激酶Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表達變化并探討芝麻素對人肺腺癌A-549細胞株的抑制增殖和誘導凋亡的作用機制。
　　結(jié)果：(1)MTT法檢測結(jié)果表明:10μg/ml-80μg/ml芝麻素對人肺腺癌A-549細胞株均有明顯抑制作用，且呈現(xiàn)出濃度和時間依賴性；（2)形態(tài)學觀察:倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)實驗組細胞體積變小變圓，核染色質(zhì)凝集，細胞

3、間連接疏松，貼壁能力減弱;HE染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)實驗組細胞質(zhì)脫水濃縮，伊紅染色增強等典型的細胞形態(tài)學變化；(3)流式細胞儀分析結(jié)果:40μg/m1藥物作用48h后，出現(xiàn)明顯的細胞凋亡峰，且S期細胞明顯增多，而G期細胞明顯減少，多數(shù)細胞阻滯在S期；Bcl-2蛋白的表達降低，Bax蛋白的表達升高。(4)免疫細胞化學(SABC法)檢測發(fā)現(xiàn)實驗組細胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表達增加與對照組相比較均有顯著差異(P<0