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文檔簡介
1、背景及目的:人重組血管內皮抑制素(Endostatin,恩度)是特異性的血管內皮生長因子,大量研究提示其通過抑制腫瘤的新生血管起到抑制腫瘤生長的作用。在我國,胃癌是常見的消化道惡性腫瘤,由于缺乏有效的治療藥物,五年生存率較低。相關研究提示胃癌的新生血管較周圍組織增多,且程度與其生長、轉移及預后密切相關,因此應用恩度治療胃癌可能具有良好的效果。本實驗通過MTT法檢測恩度對于NCI-N87人胃癌細胞的抑制效應,并觀察恩度作用后細胞凋亡率的改
2、變及對Snail和E-cadherin蛋白表達的影響,初步探討恩度對于胃癌的抑制效應及機制,為臨床應用提供理論和實驗依據。
方法:將體外培養(yǎng)的NCI-N87人胃癌細胞用恩度干預后,通過MTT比色法檢測恩度對NCI-N87增殖的影響,流式細胞儀和Transwell侵襲試驗檢測細胞凋亡和侵襲力的改變,Western blot檢測snail、E-cadherin表達的變化。
結果:(1)恩度對NCI-N87細胞增殖
3、的影響恩度對NCI-N87細胞的增殖表現出抑制作用,且呈劑量依賴性,隨著恩度濃度增加,抑制率顯著增加。
(2)恩度對NCI-N87細胞凋亡的影響對照組細胞凋亡率為4.43%,與對照組比較,實驗組細胞凋亡數明顯增加,凋亡率為32.83%,而且細胞周期阻滯于G1期(78.64%),S期細胞減少,僅占3.17%。對照組與實驗組間比較具有顯著性差異(P<0.05)。
(3)Transwell體外侵襲試驗 Transw
4、ell小室培養(yǎng)細胞24h后,對照組NCI-N87細胞穿膜細胞數為215.65+4.041,恩度組穿膜細胞數為121.33士5.859,兩者相比差異具有顯著性(p<0.05)。
(4)恩度作用后NCI-N87細胞Snail和E-cadherin表達的改變Western-blot檢測發(fā)現,對照組見明亮Snail和微弱的E-cadherin印跡:恩度組與對照組相比,Snail印跡減弱,E-cadherin印跡增強。
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