手性α-氨基膦酸酯類衍生物與煙草花葉病毒外殼蛋白(TMVCP)的相互作用研究.pdf

1、毒氟磷作為一種抗病毒劑，具有良好的抗煙草花葉病毒(tobacco mosaic virus, TMV)活性。本課題組以毒氟磷為基礎(chǔ)，合成了一系列具有高活性的手性α-氨基膦酸酯類化合物，并對(duì)該系列化合物進(jìn)行了生物學(xué)篩選。研究表明，手性對(duì)映體GUFCC-039-R的活性大于GUFCC-039-S的活性。但是，GUFCC-039-R的作用機(jī)制是什么，我們還不是很清楚。
　　本論文以煙草花葉病毒外殼蛋白(tobacco mosaic vi

2、rus coat protein, TMV CP)為潛在靶標(biāo)蛋白，以手性α-氨基膦酸酯類衍生物為配體小分子，通過熒光滴定和等溫滴定量熱法等方法研究活性小分子與 TMV CP之間的相互作用。通過分子對(duì)接尋找GUFCC-039-R與TMV CP可能的作用位點(diǎn)，通過基因的定點(diǎn)突變獲得突變體。然后，通過熒光滴定、等溫滴定量熱法和微量熱泳動(dòng)法研究GUFCC-039-R與TMV CP WT及其突變體之間的相互作用，驗(yàn)證其作用位點(diǎn)。明晰手性對(duì)映體的高

3、活性機(jī)制，有助于進(jìn)一步設(shè)計(jì)合成出高活性的手性化合物。
　　研究結(jié)果表明，GUFCC-039-R與TMV CP的結(jié)合能力大于GUFCC-039-S， R體與TMV CP有3個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，且與三種突變體的結(jié)合力均降低，降低最明顯的是TMV CP R90G，然后對(duì)體外重組的三種突變病毒進(jìn)行活體處理，發(fā)現(xiàn)缺失Arg90的病毒沒有了感染煙草的能力，說明R體與TMV CP的Arg90結(jié)合，導(dǎo)致病毒失去侵染的能力；繼而研究了其他5對(duì)手性α-氨基膦