骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7及丹參素抑制肝纖維化的機(jī)制研究.pdf

1、目的:觀察骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7(BMP-7)對人肝星狀細(xì)胞系LX-2中TGFβ信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響,并觀察丹參素對LX-2 BMP受體表達(dá)的影響,探討B(tài)MP信號通路對肝纖維化的影響機(jī)制。
　　 方法:體外培養(yǎng)人肝星狀細(xì)胞LX-2。分組處理48h后CCK-8法檢測BMP-7對LX-2增殖的影響；免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測BMP-7,以及丹參素對TGFβ1處理的LX-2活化和Ⅰ型膠原表達(dá)的影響；RT-PCR法檢測BMP-7對TGFβ1處理的LX

2、-21內(nèi)TGFβⅠ、Ⅱ型受體(TβRⅠ,Ⅱ),BMPⅡ型受體(BMPRⅡ),Smad3、7mRNA表達(dá)的影響,RT-PCR法檢測丹參素對TGFβ1處理的LX-2內(nèi)BMPRⅡ mRNA表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:經(jīng)TGFβ1處理后,LX-2的增殖無明顯改變。BMP-7(20-80ng/ml)處理后,LX-2細(xì)胞的增殖被抑制,隨BMP-7濃度增加抑制作用增強(qiáng)(P<0.01)。TGFβ1可促進(jìn)LX-2表達(dá)α-SMA和Ⅰ型膠原(P<0.0

3、1),加入BMP-7(20-80 ng/ml)處理48 h后可抑制細(xì)胞表達(dá)α-SMA和Ⅰ型膠原,抑制作用隨處理濃度增強(qiáng)而增強(qiáng)(P<0.01,P<0.05)；丹參素(0.0625.0.25mmol/L)也可濃度依賴性地抑制TGFβ1誘導(dǎo)的LX-2活化和Ⅰ型膠原表達(dá)(P<0.01)。TGFβ1可增加TβRⅠ、TβRⅡ、Smad3 mRNA表達(dá),減少Smad7 mRNA表達(dá)。BMP-7可減少Smad3 mRNA表達(dá)(P<0.01),增加Sma